產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

D-Luciferin（D 熒光素）：有三種，分別是 D-Luciferin, Sodium Salt/D 熒光素鈉鹽、D-Luciferin, Potassium Salt/D-熒光素鉀鹽和 D-Luciferin Firefly,free acid/D-螢火蟲(chóng)熒光素。

我公司提供幾種常用類(lèi)型的 D-Luciferin，每批試劑都經(jīng)過(guò)嚴格的質(zhì)量驗證（經(jīng) 9 次獨立的 HPLC 和 FTIR 標準法監測）和發(fā)光效率檢測，確?？蛻?hù)每次試驗的高重復性和成功性。所有產(chǎn)品都可用于體內成像分析和體外化學(xué)發(fā)光檢測實(shí)驗。D-Luciferin 是合成的螢火蟲(chóng)熒光素，結構與 promega 公司提供的甲蟲(chóng)熒光素一致，是水溶性的螢火蟲(chóng)熒光素酶底物。

（1）D-Luciferin, Sodium Salt/D 熒光素鈉鹽

分子式：NaC₁₁H₇N₂O₃S₂·H₂O 分子量：320.32 g/mol 純度：高級純（99.7%）

應 用：1）體外化學(xué)發(fā)光分析（in vitro）；2）活體成像實(shí)驗（in vivo）；3）高靈敏度 ATP 分析；步 驟：

Protocol 1：In Vitro Bioluminescent Assays/ 體外生物發(fā)光檢測

1）用 33.3 mL 蒸餾水溶解 1.0 gD-熒光素鈉鹽，配制成 100 mM 的儲存液（200×，濃度 30mg/ml）?；靹?

后立即使用或分裝后-20℃凍存。

2）用組織培養基 1∶200 稀釋儲存液，配置工作液(終濃度 150μg/mL)。

3）去除培養細胞的培養基。

4）待圖像分析前，向細胞內添加 1×熒光素工作液，然后進(jìn)行圖像分析。

Protocol 2：In vivo analysis / 活體成像分析

1）用無(wú)菌的 PBS（w/o Mg2+、Ca2+）配制 D-熒光素鈉鹽工作液(15mg/mL)，0.2um 濾膜過(guò)濾除菌。一旦

使用，保持冰冷且避光。

2）注射量取決于注射方式，具體如下：

3）注射入體內 5-10 分鐘后，進(jìn)行成像分析。

（2）D-Luciferin, Potassium Salt/D-熒光素鉀鹽;

分子式：NaC₁₁H₇N₂O₃S₂·H₂O 分子量：320.32 g/mol 純度：高級純（99.7%）

應用：1）活細胞、組織或生物體內 luc 標記基因和熒光素酶-融合基因體內/體外表達的成像分析；2）廣泛用于報告基因分析，免疫分析和 ATP 熒光衛生監測分析；

Protocol 1：In Vitro Bioluminescent Assays/ 體外生物發(fā)光檢測

1）配制成 100 mM 的儲存液（200×，濃度 30mg/ml）?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。

2）用預熱好的組織培養基 1∶200 稀釋儲存液，配制工作液(終濃度 150μg/mL)。

3）去除培養細胞的培養基直至無(wú)殘留。

4）圖像分析前立即向細胞內添加 1×熒光素工作液，然后進(jìn)行圖像分析（或者細胞放在 37℃短時(shí)間孵育后

檢測可增強信號）。

Protocol 2：In vivo analysis in mice / 小鼠活體成像分析

1）用無(wú)菌的 DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配制 D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL)，0.2um 濾膜過(guò)濾除菌。一旦

使用，保持冰冷且避光。

2）按 10 μL/g 體重的濃度向每支小鼠注射相應量的 15mg/mL 熒光素溶液；

3）腹腔注射 10-15 min 后進(jìn)行成像分析。（對每只動(dòng)物模型做熒光素動(dòng)力學(xué)研究以確定峰值信號獲取時(shí)間）

（3）D-Luciferin Firefly,free acid/D-螢火蟲(chóng)熒光素

分子式：C₁₁H₈N₂O₃S₂ 分子量：280.330 g/mol 外觀(guān)：白色至淺黃色粉末

溶解：0.25%濃度溶解于甲醇，形成近乎無(wú)色至淺黃色的清夜  

保存：-15°C 避光

應用：1）活細胞、組織或生物體內 luc 標記基因和熒光素酶-融合基因體內/體外表達的成像分析；

2）廣泛用于報告基因分析，免疫分析和 ATP 熒光衛生監測分析；

注意事項

1) 本品（firefly luciferin）和甲蟲(chóng)熒光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，僅僅是不同公司在命名上的差異。2) 本品保存和操作的過(guò)程中都要避光。另外水溶性?xún)Υ嬉哼^(guò)濾除菌后，可以-20℃或-80℃分裝凍存，避免反復凍融。如果有條件，對儲存液充氮氣或氬氣（防止氧化），穩定性和保存時(shí)間更長(cháng)，長(cháng)達1年。3) 注射方式，動(dòng)物類(lèi)型以及體重等都會(huì )影響信號的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)，確定最佳信號平臺期和最佳的檢測時(shí)間。4) 熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應用上沒(méi)有差別，兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來(lái)看，鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽，尤其是體內實(shí)驗。兩者功效相同。5) 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。