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    RNA恒溫快速擴增試劑盒(基礎型)-II

    貨號 WLRB8207KIT 售價(jià)(元) 2500
    規格 48T(50ul) CAS號
    • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
    • 相關(guān)產(chǎn)品

    RNA恒溫快速擴增試劑盒(基礎型)-II使用說(shuō)明書(shū)

    (貨號:WLRB8207KIT

    原理概述:

    本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術(shù):在恒溫條件下(42 °C),特殊修飾的反轉錄酶利用特異性引物DNA和模板RNA合成cDNA鏈,反應體系中的重組酶、單鏈DNA結合蛋白和DNA聚合酶以新合成的cDNA鏈為模板進(jìn)行快速核酸擴增反應。適用于實(shí)驗室級別的RNA擴增以及其他檢測用途的RNA擴增使用。

    產(chǎn)品特點(diǎn):

    本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應時(shí)間短(僅需30 mins)等優(yōu)點(diǎn),反應組分為干粉狀態(tài),操作簡(jiǎn)便,易于保存。

    本試劑對設備要求低,金屬浴、水浴鍋等即可進(jìn)行反應操作,無(wú)需購買(mǎi)PCR擴增儀等價(jià)格高昂的專(zhuān)屬設備。

    引物設計:

    建議使用長(cháng)度在 30-35 bp的引物,引物過(guò)短會(huì )影響擴增速度和檢測靈敏度;引物設計避免形成二級結構而影響擴增;擴增子長(cháng)度建議在150-300 bp,通常不超過(guò)500 bp。

    試劑盒組成:

    組成

    含量

    A buffer

    1.6 mL×1

    B buffer

    150 μL×1

    試劑

    48

    使用說(shuō)明書(shū)

    1

    試劑盒儲存:

    運輸條件:低溫運輸;

    儲存條件:儲存溫度 ≤ -20 oC,避光保存,避免重壓、反復凍融;

    產(chǎn)品有效期:24個(gè)月。


    操作步驟:提前30分鐘將試劑盒所需組分取出,室溫融化,震蕩混勻。

    1)    每個(gè)干粉反應管加入29.4 μL A buffer(注意:A buffer需完全融化混勻,否則會(huì )對實(shí)驗效果產(chǎn)生影響);

    2)    每個(gè)反應管分別加入2 μL上游引物和2 μL下游引物(引物濃度10 μM,對于多個(gè)反應、步驟1和步驟2可以混合后再分裝至反應管中);

    3)    向反應管中依次加入12.1 μL ddH2O和2 μL核酸模板(可根據核酸濃度調整加入的核酸模板體積,并相應調整加入的ddH2O體積,至模板與ddH2O總體積為14.1 μL);

    4)    最后向反應管中加入2.5 μL B buffer并充分混合(對于多個(gè)反應,建議將B buffer加至反應管的蓋子內側,上下顛倒反應管8-10次混勻);

    5)    混勻后,將反應液甩(或快速離心)至管子底部,然后立即將反應管放入恒溫設備中42 oC孵育30 mins;

    6)    反應結束后,加入50 μL酚/氯仿,1:1抽提反應液,12000 rpm離心5 mins,取5 μL上清進(jìn)行電泳檢測。(或者使用DNA產(chǎn)物純化試劑盒處理反應液后進(jìn)行電泳檢測)

    體系配制

    組分

    體積(μL

    A buffer

    29.4

    上游引物(10 μM)

    2

    下游引物(10 μM)

    2

    ddH2ORNA模板

    14.1

    B buffer

    2.5

    總體積

    50

    注意事項:

    1.  由于試劑盒靈敏度非常高,在進(jìn)行反應時(shí)請注意避免微量核酸染,并盡量考慮設置空白對照以確認是否有核酸污染。

    2.  試劑盒保質(zhì)期12個(gè)月。每次使用時(shí),請取出實(shí)驗所需的MIRA反應單元的數量,置于冰浴條件下并在8小時(shí)內使用;剩余部分,請置于存儲條件下。

    相關(guān)產(chǎn)品:

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    貨號

    規格

    目錄價(jià)格

    DNA恒溫快速擴增試劑盒(基礎型)

    WLB8201KIT

    48/

    2400

    DNA恒溫快速擴增試劑盒(熒光型)

    WLE8202KIT

    48/

    2400

    DNA恒溫快速擴增試劑盒(膠體金試紙條型)

    WLN8203KIT

    48/

    2400

    RNA恒溫快速擴增試劑盒(膠體金試紙條型)-II

    WLRN8209KIT

    48/

    2500

    RNA恒溫快速擴增試劑盒(基礎型)-II

    WLRB8207KIT

    48/

    2500

    RNA恒溫快速擴增試劑盒(熒光型)-II

    WLRE8208KIT

    48/

    2500

    HybriDetect試紙條

    WLFS8201

    50/

    1650

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