產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Polybrene(聚凝胺)是一類(lèi)高價(jià)離子季銨鹽多聚物，溶解后帶正電，與細胞表面的陰離子結合，能顯著(zhù)提高逆轉錄病毒對細胞的感染效率。一般能提高感染效率2～10倍。Polybrene目前廣泛用于逆轉錄病毒介導的哺乳動(dòng)物細胞轉染。。但Polybrene對某些細胞也是存在毒性的，因此，使用之前要先對細胞進(jìn)行測試。

聚凝胺又名Hexadimethrine Bromide，中文名海（地）美溴銨，是海（地）美溴銨（Hexadimethrine Bromide）液體制品的商標名，是一種非常有效的基因轉染增強劑。用于病毒介導細胞轉染常用濃度為8μg/ml，具體濃度依細胞類(lèi)型會(huì )有差異，可參閱文獻或梯度實(shí)驗摸索。Polybrene用于轉染增強劑，已經(jīng)成為全球各大實(shí)驗室和各種基因轉染服務(wù)機構最通用的方法之一，相比于硫酸魚(yú)精蛋白（Protamine sulfate，CAS：98001-69-5）和其他陽(yáng)離子的使用普遍率更高更廣泛。發(fā)表的文獻至少上萬(wàn)篇。

產(chǎn)品性質(zhì)

CAS號（CAS NO.）：28728-55-4

同義名：Hexadimethrine Bromide; 1,5-Dimethyl-1,5-diazaundecamethylene polymethobromide

中文名：海（地）美溴銨

分子量（Molecular weight）：544.43 g/mol

純度：≥94% (titration)

濃度:10mg/ml in H2O，無(wú)菌

運輸和保存方法

冰袋運輸。-20℃干燥保存，2年有效。

參考使用濃度【文獻來(lái)源】：

1）用表達H-rasV12或小鼠Trop2基因的慢病毒感染新鮮制備的小鼠皮膚角質(zhì)細胞（Keratinocytes），使用

含4 μg/ml polybrene的培養基孵育48h。之后收集細胞。

文獻：Wang J, et al. Loss of Trop2 Promotes Carcinogenesis and Features of Epithelial to Mesenchymal Transition in Squamous Cell Carcinoma. Mol Cancer Res. 2011 Dec;9(12):1686-95.

2）用ATF3 shRNA慢病毒顆粒感染6孔板培養的HepG2細胞，加入含10 μg/ml polybrene的培養基孵育

24h，polybrene用來(lái)增強慢病毒轉導效率。用嘌呤霉素（10μM）篩選陽(yáng)性轉導細胞株。

文獻：Weng S, et al. Niclosamide induced cell apoptosis via upregulation of ATF3 and activation of PERK in Hepatocellular carcinoma cells. BMC Gastroenterol. 2016 Feb 25;16:25.

3）用TLR10 shRNA慢病毒顆粒感染THP-1細胞，細胞先于polybrene（8 μg/ml）混合后，將病毒加入細

胞，病毒感染復數（MOI）為10。24h之后更換不含polybrene的新鮮培養基。用嘌呤霉素（1 μg/ml）篩選陽(yáng)性克隆株。

文獻：Le HV, et al. Stable Toll-Like Receptor 10 Knockdown in THP-1 Cells Reduces TLR-Ligand-Induced Proinflammatory Cytokine Expression. Int J Mol Sci. 2016 Jun 1;17(6).

4）為提高腺病毒轉染效率和LacZ轉基因表達，使用6μg/ml Polybrene處理病毒載體后轉入BHK-21細胞（MOI為100），轉染率提高到95%，沒(méi)有用Polybrene處理的只有2.3%轉染率。

5）NPC細胞（50% confluence）用含5 μg/ml Polybrene的NBF培養基，之后用 ZNF804A shRNA慢病毒顆粒感染細胞；24h后，更換不含polybrene的NBF培養基。24-48h之后，加入嘌呤霉素（5 μg/ml）篩選陽(yáng)性克隆株。

文獻：Chen J, et al. ZNF804A Transcriptional Networks in Differentiating Neurons Derived from Induced Pluripotent Stem Cells of Human Origin. PLoS One. 2015 Apr 23;10(4):e0124597.

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