產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

在細胞體外培養工作中，為了達到長(cháng)期保存細胞的生物活性的目的，須將細胞進(jìn)行冷凍保存，并在實(shí)驗需要的時(shí)候將其重新復蘇和培養。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用添加適量保護劑使細胞緩慢降溫至指定溫度范圍，從而到達保護細胞的目的。

 沃博生物無(wú)血清細胞凍存液是面向數百種細胞研發(fā)出的專(zhuān)用凍存液產(chǎn)品。該產(chǎn)品添加了細胞沉降穩定劑，可延緩細胞在凍存過(guò)程中的沉降速率，防止細胞互相擠壓，影響細胞凍存效果。另外，添加了細胞膜保護劑、滲透性細胞膜內保護劑、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑，這些成分在溶液中同水分子結合，發(fā)生水合作用，弱化水的結晶過(guò)程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，能大大降低細胞在凍存過(guò)程中冰晶對于細胞的損傷，有效提高細胞復蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確，不含血清、不含動(dòng)物源性蛋白，可減少各類(lèi)細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全；不僅適用于常規細胞系、原代細胞，同時(shí)亦適合于無(wú)血清培養細胞和蛋白表達細胞。

與傳統凍存液相比，無(wú)需繁瑣費時(shí)的程序凍存步驟或價(jià)格高昂的程序降溫儀，可直接重懸細胞后置于-80℃，次日轉移到液氮完成整個(gè)凍存過(guò)程，節省大量的時(shí)間和精力。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

省時(shí)省力——直接存放于-80℃冰箱凍存，無(wú)需程序降溫

安全性高——無(wú)血清，化學(xué)成分明確

高 品 質(zhì)——細胞復蘇率在90%以上

使用方便——2-8℃即可穩定保存，無(wú)需冷凍，即取即用

化學(xué)成分明確——沒(méi)有添加任何外源蛋白，減少細胞污染機會(huì )，同時(shí)減少外源蛋白對細胞正常生長(cháng)和分化的影響

操作步驟

(一)細胞凍存

1、選擇對數生長(cháng)期的細胞（90%左右），并保證在凍存前24h 內換液一次，收集細胞，并將細胞制備成單細胞懸液（貼壁細胞可能需要用胰酶消化），計數；

2、將細胞懸液1000r/min 離心5min，棄上清；

3、向細胞沉淀物中加入細胞凍存液，輕輕吹打，重懸細胞，使細胞密度達到5×10?～1×10?個(gè)/mL；

4、將上述細胞懸液按0.5ml～1.0ml 的量，分裝于無(wú)菌細胞凍存管內，擰緊管蓋，并做好標記；

5、將凍存管直接置于-80℃冰箱中，24 h后移入液氮長(cháng)期保存。

(二)細胞復蘇

1、從液氮罐中取出凍存的細胞，立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(操作時(shí)切勿使水浸沒(méi)凍存管口，以免造成細胞污染)；

2、待細胞凍存管中凍存液完全融化后，立即逐滴加入少量細胞完全培養基于該冷凍管中與細胞進(jìn)行混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有8～10mL該細胞完全培養基的試管中，輕輕混合均勻；1000r/min離心5min，棄上清；

3、加入1～2mL完全培養基重懸細胞，按照合適的接種密度將細胞接種到細胞培養容器中，加入適量的已預熱的新鮮的細胞完全培養基；

4、輕輕搖晃培養器皿，使細胞分布均勻，靜置于37℃、飽和濕度細胞培養箱中培養。

產(chǎn)品穩定性及保存條件

1、置于2～8℃避光保存，有效期為1年；

2、本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內使用，超過(guò)保質(zhì)期，必須放棄使用；

3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量，請避免反復凍融相關(guān)產(chǎn)品。

1、凍存細胞分裝至凍存管后，應減少在室溫/4℃存放時(shí)間，盡快移入到-80℃超低溫冰箱；

2、對于原代胚胎干細胞/iPS細胞/其它珍貴細胞樣本等凍存時(shí)，我們建議您在使用前，事先對所凍存的細胞進(jìn)行至少為期1周的細胞凍存測試實(shí)驗，確認沒(méi)問(wèn)題后再進(jìn)行正式凍存；

3、本產(chǎn)品經(jīng)3次0.22μm過(guò)濾除菌，使用本產(chǎn)品時(shí)應注意無(wú)菌操作，避免污染；

4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作；

5、 本產(chǎn)品僅限科研使用。