產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

吖啶橙(Acridine Orange), 屬于三環(huán)雜芳香燃料，可以標記DNA、RNA，屬于異染性熒光染料，AO常用于細胞內DNA和RNA進(jìn)行檢測。AO與核酸結合方式主要有：1、插入性結合，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，這種結合方式主要為AO與DNA的結合，其熒光發(fā)射峰為530nm，激發(fā)后呈綠色熒光，其熒光發(fā)射峰為640nm，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結合會(huì )呈桔黃色或桔紅色熒光。因此，AO嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色，與DNA單鏈或RNA結合時(shí)發(fā)橙紅色熒光。Ethidium Bromide嵌合到雙鏈DNA或RNA的堿基對中，無(wú)堿基特異性，發(fā)紅色熒光。

吖啶橙能透過(guò)胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，與雙鏈DNA結合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過(guò)胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細胞呈現為染色增強，熒光更為明亮，均勻的圓狀或固縮狀、團塊狀結構。非凋亡細胞核呈現熒光深淺不一的結構樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀(guān)察，可見(jiàn)四種細胞形態(tài)：活細胞(VN)，核染色質(zhì)著(zhù)綠色并呈正常結構；早期凋亡細胞(VA)，核染色質(zhì)著(zhù)綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細胞(NVN)，核染色質(zhì)著(zhù)橘紅色并呈正常結構。本產(chǎn)品所含穩定劑不影響實(shí)驗效果。有效期： 4度密封避光12個(gè)月有效
吖啶橙(AO)-EB雙染色試劑盒使用方法：（僅供參考）
   使用前先根據用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，先用現配。
a)對于貼壁細胞或爬片，去掉培養基，用PBS洗兩遍去除殘余培養基和未貼壁細胞，加入新的PBS；如果需要觀(guān)察全部細胞特性，保留未貼壁細胞，可以直接在培養基中加入工作液。按照每毫升培養基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀(guān)察。
b)對于懸浮細胞，可直接加入工作液或離心收集細胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀(guān)察。

染色結果：

1. 用能通過(guò)活細胞膜與DNA結合后發(fā)藍色熒光的Hoechist 33342和只能通過(guò)死細胞與DNA結合后發(fā)紅色熒光的propidium iodide對細胞進(jìn)行雙染的方法也比較常用。

2. 如有低溫離心機進(jìn)行離心效果更佳。

3. 操作過(guò)程中應注意減少染色溶液暴露于強光下的時(shí)間。

4. 含酚紅培養基對觀(guān)察有輕微影響。建議使用無(wú)酚紅培養基。

5. 染色液工作濃度和染色時(shí)間可根據具體實(shí)驗情況適當調整，以期達到佳效果。

6. EB 和吖啶橙(Acridine Orange)有一定毒性，請小心操作。

特別提醒：

1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員用于生命科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅。

2) 本公司所有產(chǎn)品必須由合格專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員操作同時(shí)佩戴口罩/手套/實(shí)驗服并遵守生物實(shí)驗室安全操作規程！