產(chǎn)品介紹

Hoechst 33258，也稱(chēng)bisBenzimide H 33258或HOE 33258，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀(guān)察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色，或常規的DNA染色。Hoechst 33258的最大激發(fā)波長(cháng)為346nm，最大發(fā)射波長(cháng)為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結合后，最大激發(fā)波長(cháng)為352nm，最大發(fā)射波長(cháng)為461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。

 產(chǎn)品性質(zhì)

 中文名稱(chēng)：二苯甲亞胺

英文名稱(chēng)：’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride；bisBenzimide H 33258; HOE 33258

分子式：C25H24N6O·3HCl

分子量：533.88

CAS：23491-45-4

純度：≥95%（HPLC）

存儲條件：-20 ℃避光保存。

使用說(shuō)明： 1. 對于固定的細胞或組織：

a. 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續的Hoechst 33258染色。

b. 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可；對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。

c. 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

d. 直接在熒光顯微鏡下觀(guān)察或封片后熒光顯微鏡下觀(guān)察。細胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì )看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

2. 對于活細胞或組織：

a. 加入適當量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個(gè)孔需加入100微升染色液。

b. 在適宜于細胞培養的溫度下培養20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測。

注意事項：

熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當天完成檢測，活細胞或組織染色后應立即觀(guān)察。

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

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