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    TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

    貨號 wb30520-1KU 售價(jià)(元) 1000
    規格 1KU CAS號
    • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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    產(chǎn)品信息

    貨號

    名稱(chēng)

    規格

    價(jià)格

    wb30520-1KU

    TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

    1KU

    1000

    wb30520-5KU

    TEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

    5KU

    4599





    產(chǎn)品描述

    重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過(guò)基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,不僅保持天然TEV酶的功能活性,且在廣譜的溫度范圍內表現出更好的穩定性和特異性。rTEV是一種用來(lái)切除融合蛋白上親和標簽的常用工具酶,具有很強的位點(diǎn)特異性,嚴格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEVpH 7.0,30°C時(shí)可達到最佳活性,但在pH 6.0-8.5和溫度4-30°C的廣泛范圍內皆有活性,使得反應條件的選擇可根據目的蛋白的情況而靈活變動(dòng)。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His標簽,通過(guò)Ni-NTAP7151)樹(shù)脂去除,以達到純化目的蛋白的目的。

    產(chǎn)品性質(zhì)

    來(lái)源(Source

    大腸桿菌

    外觀(guān)(Appearance

    無(wú)色透明液體

    比活力(Specific Activity

    10 U/μl

    活性定義(Unit Definition

    1×rTEV Buffer50 mM Tris,pH8.0,0.5 mM EDTA,1mM DTT)中,30℃反應1h,剪切>85%3 μg底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。

    純化(Purification 

    Ni親和純化

    純度(Purity

    ≥95%by SDS-PAGE

    產(chǎn)品組分

    TEV Protease儲存液

    10X Cleavage Buffer

    25 mM Tris-HCl,pH 8.0

    10 mM DTT

    150 mM NaCl

    500 mM Tris-HCl,pH 8.0

    50 mM DTT

    50 mM DTT

    1Mm EDTA

    50%V / VGlycerin

    運輸與保存方法

    冰袋(wet ice)運輸。

    1. 在EP管中配制如下反應體系,

    融合蛋白

    50 μg

    rTEV Protease

    2μl(10U/μl)

    rTEV buffer 10×

    10μl

    ddH2O(超純水)

    up to 150 μl

    2.反應時(shí)間參考表

    反應體系

    不同溫度下參考反應時(shí)間

    4°C

    20°C

    30°C

    反應時(shí)間

    15-16h

    6h

    2h

    待測融合蛋白100μg,加入TEV Protease 2μl,4℃反應16小時(shí),取酶切前后樣品SDS-PAGE檢測,如右圖所示 >90% 融合蛋白被切割。

    TEV Protease活性測試


    長(cháng)期儲存于 -80℃,可保存2年;或小量分裝后保存于 -20℃,可保存6個(gè)月,避免反復凍融。10X rTEV buffer (10×)Buffer置于 -20℃保存。

    注意事項

    為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。



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