產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Human DiI-High Density Lipoprotein為熒光探針DiI（1,1-dioctadecyl-3,3,3,3- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）標記的高密度脂蛋白，可以用來(lái)觀(guān)察培養細胞的HDL結合位點(diǎn)，或篩選HDL受體表達缺陷型細胞突變株。也可以通過(guò)流式細胞術(shù)評估細胞受體水平，或檢測組織內的受體水平。

沃博生物提供的Human DiI-HDL為無(wú)菌包裝，可以直接稀釋使用。除提供DiI-HDL，我們還提供不帶標記的HDL，I125標記的HDL。

制備與使用方法

純化的人健康血漿來(lái)源的HDL直接標記上DiI熒光探針，然后通過(guò)超速離心以及透析的方法純化回收標記產(chǎn)物，并濾膜過(guò)濾除菌。純化的DiI-HDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS，pH 7.4中。

操作步驟

a）無(wú)菌條件下，將DiI-HDL用細胞培養基稀釋至10-30 μg/ml。

b）加入活細胞內，37℃培養4-5小時(shí)。

c）孵育結束，吸去含有Human DiI-HDL的培養基，并用無(wú)探針的培養基洗幾次。

d）根據實(shí)驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

1) 熒光顯微鏡觀(guān)察

采用標準的羅丹明激發(fā)：發(fā)射濾光片（或建議使用波長(cháng)為：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要請使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因DiI易溶于有機溶劑?！咀ⅰ浚盒柙O陽(yáng)性細胞以做對照。

2) 細胞分選（流式細胞術(shù)）

胰蛋白酶處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液，選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽(yáng)性對照，從而進(jìn)行流式分選設門(mén)（gate）。（建議使用波長(cháng)為Ex: 514/549nm; Em: 565nm）。

產(chǎn)品屬性

濃度：0.8-3.0 mg/ml

外觀(guān)：乳狀液體

吸光度比例：DiI/Protein=555nm/275nm=1.4

緩沖液組分：0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4

運輸與保存方法：冰袋運輸；4oC無(wú)菌避光，收到貨后可穩定保存6周。千萬(wàn)不可凍存！

注意事項

1）本品的稀釋工作液極不穩定，建議即配即用；使用時(shí)一定要無(wú)菌操作！

2）長(cháng)期貯存可能會(huì )有沉淀析出，屬于正?，F象，低速離心2 min去除沉淀即可使用；

3）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

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