產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

超快轉膜液使用獨特配方，能高效超快地將蛋白轉移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。濕轉法（Tank blot）或半干轉法（Semi-dry blot）都可以使用。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

快速高效：分子量100kD以下蛋白只需轉膜30-40分鐘。與傳統轉膜液相比，發(fā)熱量更低。
兼容性好：超快轉膜液能兼容LaemmLi膠，預制膠，Bis-Tris膠等多種凝膠。
轉移效率高：超快轉膜液對分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉移效率，有效的解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時(shí)轉移的問(wèn)題。

使用說(shuō)明

轉膜前準備：5-6張裁好的濾紙：裁好的轉印膜；足夠的1×超快轉移buffer。

一、濕轉法（Tank blot）

1、配制1×超快轉膜液

1升1×Western超快轉膜液：取50ml 20×超快轉膜液，加入750ml雙蒸水，混勻后加入200ml甲醇，混勻即可，現配現用，配好后置于冰上存放）。

2、將濾紙和海綿浸泡在1×超快轉膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快轉膜液中（注意：在使用6%或8%分離膠轉移大分子蛋白時(shí)，應該降低甲醇含量至10%，以獲得更好轉移效果）。

注意：1、要徹底清除三明治結構中的氣泡，適當補加1×超快轉膜液保持三明治結構濕潤。

2、PVDF膜使用前要用無(wú)水甲醇潤濕30秒。

3、三明治結構的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會(huì )影響轉印效果。如果太緊的話(huà)，可以去除陽(yáng)極一側的海綿或濾紙。

5、將三明治結構放于轉移槽中。

  1、按照下表配制1×超快轉膜液

2、將濾紙浸泡在1×超快轉膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快

轉膜液中。

注意：水中漂洗時(shí)間一定不能超過(guò)2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉移。

半干轉時(shí)，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙≥膜≥膠≥上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬(wàn)不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會(huì )造成短路。

注意：PVDF膜使用前需用無(wú)水甲醇潤濕30秒。

三、轉移條件

1、濕轉

 推薦使用恒流轉移，電流可設置350-400mA，轉膜液中離子成分較多，可以承受大電流，并且發(fā)熱量較低。

注：不推薦使用恒壓轉移，因轉膜液中離子成分較多，當電壓在100v左右時(shí)，電流會(huì )達到400mA，此時(shí)已達到普通電泳儀器zui大電流，隨著(zhù)時(shí)間延長(cháng)，可能無(wú)法達到穩定的100v電壓。

2、半干轉

保存：常溫保存，有效期兩年。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。