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    LwaCas13a Nuclease 核酸酶 Cas13a

    貨號 E381 售價(jià)(元) 2600/10400
    規格 200pmol/1000pmol CAS號
    • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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    產(chǎn)品信息

    貨號

    名稱(chēng)

    規格

    單價(jià)/

    E373-YH01-01B

    LbaCas12a Nuclease

    50ug

    1286

    E373-YH01-01A

    LbaCas12a Nuclease

    500ug

    4000

    E381-01A

    LwaCas13a Nuclease

    200pmol

    2600

    E381-01B

    LwaCas13a Nuclease

    1000pmol

    10400

    產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    Cas13a核酸酶(又名C2c2)是VI型CRISPR-Cas系統效應蛋白,具有RNA介導的RNA內切酶活性。在靶標單鏈RNA存在PFS序列的情況下,可特異性地切割靶標RNA。此外,Cas13a還具有依賴(lài)于靶標單鏈RNA的反式切割活性(即旁路切割活性),可用于開(kāi)發(fā)靶標核酸的快速檢測試劑盒。

    本公司開(kāi)發(fā)的Cas13a Nuclease源自L(fǎng)eptotrichia wadei(Lwa) 細菌,采用大腸桿菌重組表達,純度超過(guò)95%,既可以用于體外RNA切割,體外RNA檢測,也可用于活細胞RNA的調控、RNA基因編輯,同時(shí)也可以用于光學(xué)探針生物學(xué)標記。Cas13a在體外與crRNA穩定結合,將Cas13a/crRNA(或者crRNA質(zhì)粒)轉入細胞,實(shí)現細胞內RNA的編輯,Cas13a/crRNA也可以被靶RNA激活,從而實(shí)現體外高靈敏度的RNA檢測。

    使用建議:

    1) 建議全程在冰上配制體系。

    2) 為了保證反應的正常進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的RNA模板。

    3) 使用RNase Free的耗材(離心管、槍頭等)。

    產(chǎn)品說(shuō)明:

    1) 蛋白分子量為140kDa

    140ng/μl = 1pmol/μl

    2) crRNA設計

    可以根據如下說(shuō)明設計LwaCas13a Nuclease 的crRNA。其序列為5’-GAUUUAGACUACCCCAAAAACGAAGGGGACUAAAACNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN-3’

    其中,5’-Direct Repeat region (長(cháng)度36nt,直接重復區,紅色字體) + Spacer region(長(cháng)度25-35nt,靶標結合區,灰色區域)-3’。

    注:Cas13a切割靶標ssRNA需要特定5’-A/U/C-3’的PFS(protospacer flanking sequence)。

    保存溫度:

    -70℃保存。

    產(chǎn)品包裝

    保存體系:

    500mM NaCl,20mM sodium acetate,0.1mM EDTA,1mM TCEP,50% (v/v) Glycerol,pH6.0,at 25℃。

    質(zhì)量保證:

    經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測僅可見(jiàn)清晰單一的目的條帶,純度達95%;內毒素含量< 100EU/mg;qPCR方法檢測無(wú)大腸桿菌基因組殘留;無(wú)RNase、核酸內、外切酶污染。

    切割體系(20μl):

    在冰水浴上混合以下體系:

     

    37 ℃每30-60s收集一次熒光,80-99cycles。

            For research use only.



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