正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義：

類(lèi)黃酮是一類(lèi)多苯化合物，屬于植物次生代謝物，對人體具有消炎，抗菌，降血脂，清除體內羥自由基，預防癌癥等作用。

測定原理：

在堿性亞硝酸鹽溶液中，類(lèi)黃酮與鋁離子形成在510nm處有特征吸收峰的紅色絡(luò )合物，測定樣品提取液在510nm處的吸光值，即可計算樣品類(lèi)黃酮含量。

組成：

自備儀器和用品：

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

類(lèi)黃酮提取：

將樣本烘干至恒重，粉碎，過(guò)40目篩之后，稱(chēng)取約0.02g，加入2ml提取液，60℃振蕩提取2h，10000g，25℃，離心10min，取上清待測。

測定操作表

1、 分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長(cháng)至500nm，蒸餾水調零。

2、 操作表

類(lèi)黃酮含量計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線(xiàn)：y = 5.02x+0.0007，R² = 0.9996  

類(lèi)黃酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷5.02÷(W÷V樣總)= 0.398×（ΔA -0.0007）÷W

V樣總：加入提取液體積，2.5ml； V樣：反應中樣品體積，0.108ml； W：樣品質(zhì)量，g

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線(xiàn)：y = 2.51x+0.0007，R² = 0.9996

類(lèi)黃酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷2.51÷(W÷V樣總)= 0.797×（ΔA -0.0007）÷W

V樣總：加入提取液體積，2ml；V樣：反應中樣品體積，0.108ml；W：樣品質(zhì)量，g

最低檢出限為10μg/g。