測定意義：

UA是鳥(niǎo)類(lèi)和爬行類(lèi)動(dòng)物的主要代謝產(chǎn)物，正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素，含少量尿酸。此外，UA還是重要的抗氧化劑，能清除超氧化物，羥自由基等。體內UA生成量和排泄量不平衡會(huì )導致多種疾病的發(fā)生。例如，血中UA升高會(huì )引起痛風(fēng)、腎功能損害和動(dòng)脈硬化，相反UA降低會(huì )引起惡性貧血，在臨床診斷上具有重要的意義。

測定原理：

尿酸酶能催化UA生成尿囊素，CO2及H2O2，H2O2 氧化亞鐵氰化鉀中的Fe2+ 生成Fe3+ ，Fe3+進(jìn)一步與酚和4-氨基安替比林縮合生成紅色醌類(lèi)化合物，在505nm下有特征吸收峰，測定反應體系505nm的吸收值，可計算尿酸的含量。

組成：

試劑一：

A：用于標準管和測定管，粉劑1瓶，4℃避光保存，使用前加13ml緩沖液溶解。

B：用于空白管，粉劑1瓶，4℃避光保存，使用前加7 ml緩沖液溶解。

試劑二：粉劑1管，4℃避光保存，使用前加2ml蒸餾水溶解，60℃加熱溶解。

自備儀器和用品：

恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

樣品的制備：

1. 動(dòng)植物組織：建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml生理鹽水或蒸餾水，進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2. 血清，培養液：直接檢測。

測定操作表

1、 分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長(cháng)至505nm。

2、 操作表

UV含量計算公式：

1. 組織：

（1）按樣本重量計算

尿酸含量（μmol/g 鮮重）=C標準品×（A測定管－A空白管）÷（A標準管－A空白管）÷ （W÷V樣總）=0.5×（A測定管－A空白管）÷（A標準管－A空白管）÷ W

（2）按樣本蛋白濃度計算

尿酸含量（μmol/mg prot）=C標準品×（A測定管－A空白管）÷（A標準管－A空白管）÷ Cpr =0.5×（A測定管－A空白管）÷（A標準管－A空白管）÷Cpr

尿酸（μmol/L）= C標準品×（A測定管－A空白管）÷（A標準管－A空白管）×10³

=500×（A測定管－A空白管）÷（A標準管－A空白管）

C標：標準品濃度0.5μmol/ml；V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；10³ ：1μmol/ L=10³μmol/ ml

注意事項：

1. 血清樣本請在24小時(shí)內測定，或者4℃密封避光保存不超過(guò)72小時(shí)。

2. 吸光值大于0.8可用蒸餾水稀釋樣本，并在計算公式中算入稀釋倍數。

3. 最低檢出限為10μmol/L。