測定意義：

氮素是構成生物體的一種必需元素，自然界中的氮素循環(huán)包括許多轉化作用?？諝庵械牡獨獗还痰⑸锛爸参锱c微生物的共生體固定成氨態(tài)氮，經(jīng)過(guò)硝化微生物的作用轉化成硝態(tài)氮，后者被植物或微生物同化成有機氮化物，植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。

測定原理：

α-氨基酸與水合茚三酮溶液一起加熱，經(jīng)氧化脫氨變成相應的α-酮酸，酮酸進(jìn)一步脫羧變成醛，水合茚三酮則被還原，在弱酸環(huán)境中，還原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反應， 縮合生成藍紫色物質(zhì)，在580nm處有特征吸收峰。

組成：

試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1.5ml蒸餾水充分溶解。

自備儀器和用品：

天平、研缽、常溫離心機、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

樣本處理：

按照質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g，加入1ml提取液）加入提取液，室溫勻漿后于25℃，12000g離心10min，取上清待測。

測定操作表：

注意：空白管只需測定一次。

計算公式：

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線(xiàn)：y=0.1535x-0.0279，R²=0.9993

NH₄⁺—N含量（μg/g 鮮重）=（△A+0.0279）÷ 0.1535×V反總÷（W×V樣÷V樣總）

                = 32.9×（△A+0.0279）÷W

V反總：反應總體積，0.315ml；V樣：反應體系中加入樣本體積，0.06ml；V樣總：加入提取液體積，1ml，W：樣本質(zhì)量，g

b. 用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線(xiàn)：y=0.0768x-0.0279，R²=0.9993

NH₄⁺—N含量（μg/g 鮮重）=（△A+0.0279）÷ 0.0768×V反總÷（W×V樣÷V樣總）

                = 65.8×（△A+0.0279）÷W

V反總：反應總體積，0.315ml；V樣：反應體系中加入樣本體積，0.06ml；V樣總：加入提取液體積，1ml，W：樣本質(zhì)量，g

注意事項：

1. 提取好的待測液盡快測定，低溫保存不得超過(guò)24小時(shí)。

2. 沸水浴時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)，否則會(huì )對測定結果有影響。

3. 顯色后20min內完成測定。

4. 最低檢出限為18μg/g。