測定意義：

乳酸是生物體代謝過(guò)程中重要的中間產(chǎn)物，與糖代謝、脂類(lèi)代謝、蛋白質(zhì)代謝及細胞內能量代謝密切相關(guān)，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。

測定原理：

乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸，同時(shí)使NAD⁺還原生成NADH和H⁺，H⁺傳遞給PMS生成的PMSH₂還原INT生成紅色物質(zhì)，在530nm處有特征吸收峰。

組成：

試劑三：粉劑×1支，-20℃避光保存。臨用前加入0.6ml蒸餾水充分溶解。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加6ml蒸餾水充分溶解。

顯色液：臨用前根據用量按照提取液（V）：試劑三（V）：試劑四（V）：試劑五（m）=1（ml)：0.3（ml)：3（ml)：15（mg）的比例充分混勻。（注意：現配現用，用多少配多少，在棕色瓶中配制，試劑盒中帶有4個(gè)棕色空瓶）

自備儀器和用品：

天平、研缽、離心機、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

樣本處理：

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g，加入1ml提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，12000g離心10min，取上清測定。

2. 細胞：按照細胞數量（10⁴個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；于4℃，12000g離心10min，取上清測定。

3. 血清：直接測定。              

測定操作：

注意：標準對照管和標準測定管只需測定一次，每個(gè)樣品測定管設一個(gè)樣品對照管

計算公式：

1. 按照蛋白含量計算

LA含量（μmol/mg prot）= △A樣÷△A標×C標÷ Cpr

                      = 2×△A樣÷△A標÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

LA含量（μmol/g 鮮重）= △A樣÷△A標×C標÷ W

                      = 2×△A樣÷△A標÷ W

3. 按照細胞數量計算

LA含量（μmol/10⁴ cell）= △A樣÷△A標×C標÷ 細胞數量

                      = 2×△A樣÷△A標÷ 細胞數量

4. 按照液體體積計算

LA含量（μmol/ml）= △A樣÷△A標×C標

                   = 2×△A樣÷△A標

C標：標準品濃度，2mmol/L；W：樣本質(zhì)量，g/ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml

注意事項：

若吸光值超過(guò)2，請進(jìn)行適當的稀釋后再進(jìn)行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數。

最低檢出限為1.8μmol/L。