正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義：

S-UE能夠水解尿素，產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。

測定原理：

利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH₃-N。

試劑的組成和配制：

試劑二：粉劑×1瓶，臨用前加入20ml蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的試劑4℃保存；

試劑四A液：液體1ml×1瓶，4℃保存；試劑四B液：液體4ml×1瓶，4℃保存；臨用前將A液倒入B液中混合，待用；用不完的試劑4℃保存一周。

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50目篩。

測定步驟：

1、培養

2、將培養結束的上清液稀釋10倍（取0.1ml上清液，加入0.9ml蒸餾水）。

3、測氨量：

混勻， 578nm處蒸餾水調零，測A值，ΔA=A測定管-A對照管。每個(gè)測定管設一個(gè)對照管。

脲酶活力計算：

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373；x為標準品濃度（μg/ml），y為吸光值。

單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μg NH₃-N定義為一個(gè)酶活力單位。

脲酶活力（μg/d /g 土樣）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷W÷T =874×(ΔA -0.0373)

10：稀釋倍數；T：反應時(shí)間，1d； V反總：反應體系總體積：2ml；W：樣本質(zhì)量，0.25g。