測定意義：

S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類(lèi)，在H₂O₂清除系統中具有重要作用。

測定原理：

H₂O₂在240nm下有特征吸收峰，通過(guò)測定與土壤反應后溶液在此波長(cháng)下吸光度的變化，即可反應S-CAT活性的高低。

試劑組成和配制：

試劑一：液體300μl×1瓶，4℃保存；臨用前加入29.7ml蒸餾水充分溶解后待用；用不完的試劑4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入1ml蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存（如出現結晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV板）和蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50目篩。

測定步驟：

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長(cháng)至240nm，蒸餾水調零。

2、測定前務(wù)必準備96孔UV板一塊（UV板不是普通酶標板，普通酶標板只能透過(guò)可見(jiàn)光，不能透過(guò)紫外光，檢測波長(cháng)小于340nm務(wù)必使用UV板）。

3、加樣表。

注意事項

每個(gè)測定管要設一個(gè)無(wú)基質(zhì)管，無(wú)土管只要做一管。

S-CAT活性計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

單位的定義：每天每g風(fēng)干土樣催化1μmol H₂O₂降解定義為一個(gè)酶活力單位。

計算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A無(wú)土管-A測定管+A無(wú)基質(zhì)管)×V反總÷（ε×d）×10⁶]÷W÷T=16.5×（A無(wú)土管-A測定管+A無(wú)基質(zhì)管）

V反總：反應體系總體積，3×10^-4 L；ε：過(guò)氧化氫摩爾消光系數，4.36×10⁴ L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm； T：反應時(shí)間，20 min=1/72d； W：樣本質(zhì)量，0.03g。

b.用96孔板測定的計算公式如下

單位的定義：每天每g風(fēng)干土樣催化1μmol H₂O₂降解定義為一個(gè)酶活力單位。

計算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A無(wú)土管-A測定管+A無(wú)基質(zhì)管)×V反總÷（ε×d）×10⁶]÷W÷T=33×（A無(wú)土管－A測定管+A無(wú)基質(zhì)管）

V反總：反應體系總體積，3×10^-4 L；ε：過(guò)氧化氫摩爾消光系數，4.36×10⁴ L / mol /cm；d：96孔板光徑，0.5cm； T：反應時(shí)間，20 min=1/72d； W：樣品質(zhì)量，0.03g。