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    土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)檢測試劑盒(100T/48S)

    貨號 SH0335 售價(jià)(元) 1260
    規格 100T/48S CAS號
    • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
    • 相關(guān)產(chǎn)品

    貨號

    名稱(chēng)

    規格

    SH0335

    土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

    100管/48樣

    正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本做預測定                                             

    測定意義:

    S-α-GC能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團之間的糖苷鍵生成葡萄糖,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一,在土壤微生物的糖類(lèi)代謝方面具有重要生理功能。

    測定原理:

    S-α-GC能夠催化對-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。

    試劑組成和配制:

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    SH0335-100T/48S

    Storage

    試劑一:甲苯

    5ml(自備)

    4℃

    試劑二:粉劑

    1

    -20

    試劑三:液體

    20ml

    4℃

    試劑液體

    15ml

    4℃

    說(shuō)明書(shū)

    一份

    試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10ml蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存。

    自備儀器和用品:

    可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

    樣品處理:

    新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。

    測定步驟:

    1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長(cháng)至400nm,蒸餾水調零。

    2、加樣表

    試劑名稱(chēng)

    測定管

    對照管

    風(fēng)干土樣(g

    0.02

    0.02

    試劑一(μl

    10

    10

     

    室溫振蕩混勻15min

    90℃振蕩混勻15min

    試劑二(μl

    130

     

    蒸餾水

     

    130

    試劑三(μl

    160

    160

    混勻, 37℃振蕩反應1h后,90℃水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻,

    10000g 25℃離心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列試劑);

    上清液μl

    70

    70

    試劑四μl

    130

    130

    充分混勻,室溫靜置2min后, 400nm處測定吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個(gè)測定管設一個(gè)對照管。

    S-α-GC活力計算

    a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

    標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0032x -0.0027;x為標準品濃度(μmol/L),y為吸光值。

    單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。

    S-α-GC活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反總÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)

    T:反應時(shí)間,1h=1/24d; V反總:反應體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質(zhì)量,0.02g。

    b.96孔板測定的計算公式如下

    標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0016x -0.0027;x為標準品濃度(μmol/L),y為吸光值。

    單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。

    S-α-GC活力(μmol/d /g 土樣)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反總÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)

    T:反應時(shí)間,1h=1/24d; V反總:反應體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質(zhì)量,0.02g。

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