測定意義：

GLS（EC 3.5.1.2）存在于高等動(dòng)物和某些細菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代謝中具有重要調控作用，尤其是調節游離氨含量和尿素代謝。

測定原理：

S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏試劑檢測氨增加的速率，即可計算其酶活性。

試劑組成和配制：

自備儀器和用品：

臺式離心機、可見(jiàn)分光光度計、1ml玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽、甲苯、冰和雙蒸水。

測定步驟：

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長(cháng)至420nm，蒸餾水調零。

2、樣品測定（在EP管中加入下列試劑）；

振蕩混勻，室溫放置15min；

混勻，37℃水浴2 小時(shí)

混勻，8000 g，25℃離心10 min；取上清液，依次加入下列試劑

混勻，室溫靜置15min，420nm處讀取測定管和對照管吸光值，

計算ΔA=A測定管-A對照管。對照管只要做一管。

注意事項:

試劑六如出現沉淀，靜置后取上清使用。

酶活性計算：

標準條件下測定的回歸方程為y = 3.8488x +0.0057；x為標準品濃度（μmol/ml），y為吸光值A。

單位定義：每g土樣每min催化谷氨酰胺生成1nmol 氨定義為一個(gè)酶活力單位。

 S-GLS（nmol/min/g 土樣）=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反總÷W÷T×1000

=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。

V反總：反應體系總體積：1.05ml；T：反應時(shí)間，2h=120min；W：樣本質(zhì)量，g; 1000，μmol到nmol換算系數。