測定意義：

土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內活性微生物量以及其對有機物的降解活性，可以作為土壤微生物的降解性能指標。

測定原理：

氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在細胞呼吸過(guò)程中接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），在波長(cháng)485nm處有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm測定其吸光值，即得土壤脫氫酶活性。

試劑的組成和配制：

試劑一：粉劑×1瓶，使用前加10ml試劑二溶解，4℃避光保存（盡量現配現用）。

自備儀器和用品：

篩子、天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見(jiàn)分光光度計、玻璃比色皿，蒸餾水、甲醇（不允許快遞，請用戶(hù)自備）。

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50目篩。

測定步驟和操作表：

充分混勻，37℃培養24h。

振蕩1h，8000g， 25℃，離心5min，取上清1ml于1ml玻璃比色皿，測定A485，△A=A測定-A空白?？瞻坠苤灰鲆还?。

注意事項

配制好的試劑一避光保存于4℃，最好在一周內使用，若出現紅色，則不能使用。

脫氫酶活力計算：

標準曲線(xiàn)：y = 0.0422x - 0.0312；R² = 0.9988；x為標準品濃度（μg/ml），y為吸光值。

酶活單位定義：在37℃時(shí)，每克土壤樣品每天催化產(chǎn)生1μgTF為一個(gè)酶活性單位。

sDHA（μg/ d /g 土樣）=（△A+0.0312）÷ 0.0422×V反總÷W÷T= 47.39×（△A+0.0312）÷W

V反總：反應總體積，2ml；T：培養時(shí)間，1d；W：樣品質(zhì)量，g。