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    土壤幾丁質(zhì)酶(S-Chitinase)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

    貨號 SH0369 售價(jià)(元) 816
    規格 50T/24S CAS號
    • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
    • 相關(guān)產(chǎn)品

    貨號

    名稱(chēng)

    規格

    SH0369

    土壤幾丁質(zhì)酶(S-Chitinase)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

    50管/24樣

    正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本做預測定                                             

    測定意義:

    幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲(chóng)等甲殼類(lèi)動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類(lèi)的細胞壁中,而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。

    測定原理:

    幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,進(jìn)一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

    試劑組成和配制:

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    SH0369-50T/24S

    Storage

    試劑一:液體

    10ml

    4℃

    試劑二:液體

    4ml

    4℃

    試劑三:液體

    50ml

    4℃避光

    說(shuō)明書(shū)

    一份

    自備儀器和用品:

    天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見(jiàn)分光光度計、1 ml玻璃比色皿,甲苯、蒸餾水。

    樣品處理:

    新鮮土樣風(fēng)干,過(guò)30-50目篩。

    測定操作表:

     

    對照管

    測定管

    土樣(g

    0.2

    0.2

    甲苯(μl

    30

    30

    混勻,25℃靜置15min

    蒸餾水(μl

    200

     

    試劑一(μl

     

    200

    混勻,37℃培養24h

    蒸餾水(μl

    400

    400

    4000rpm,4℃,離心10min,取上清300μl于新的EP管中

    試劑二(μl

    30

    30

    混勻,沸水浴5min

    試劑三(μl

    900

    900

    混勻,37℃顯色20min,取1ml1ml玻璃比色皿中,蒸餾水調零,測定585nm處吸光值,記為A對照管和A測定管,ΔA=A測定管-A對照管。

    計算公式

    標準曲線(xiàn):y=5.2714x-0.0007,R2=0.9989;x為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值ΔA。

    酶活性定義:37℃條件下,每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。

    土壤幾丁質(zhì)酶活性(μg/d/g 土樣)=ΔA +0.0007÷5.2714×V反總÷W÷T×1000= 598×ΔA +0.0007

    V反總:反應體系總體積,0.63ml;W:樣本質(zhì)量,0.2g;T:反應時(shí)間,1d;10001mg/ml=1000μg/ml

    注意事項:

    試劑一充分混勻后再使用。

     

     

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