測定意義：

TG是長(cháng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不僅是細胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。

測定原理：

用異丙醇提取TG，脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸（FFA），甘油與三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H₂O₂，過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在505 nm處有特征吸收峰。

組成：

自備儀器和用品：

酶標儀、臺式離心機、可調式移液槍、96孔板、研缽、冰和蒸餾水

TG的提?。?/span>

1、 組織中TG的提?。?/span>按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清，即TG待測液。

2、細胞、細菌中TG的提?。?/span>先收集400-500萬(wàn)細胞或細菌到離心管內，離心后棄上清，加1ml試劑一，超聲波破碎1min（強度20％，超聲2s，停1s），8000g，4℃離心10min，取上清，即TG待測液。

3、血清（漿）樣品：直接測定。

測定操作：

酶標儀預熱30min，調節波長(cháng)到505 nm。

混勻，室溫下靜置20min，于505 nm波長(cháng)處讀取吸光值，記為A空白和A測定，△A=A測定-A空白?？瞻坠苤恍铚y一管。

計算公式：

標準曲線(xiàn)：y = 0.3261x - 0.0199； R² = 0.9979；x：標準品濃度（mg/ml） y：吸光值差值ΔA。

1. 血清（漿）中甘油三酯含量計算：

TG含量（mg/ml）=（ΔA+0.0199）÷ 0.3261=3.07×（ΔA+0.0199）

2. 組織、細菌或細胞中甘油三酯含量計算：

(1)按樣本蛋白濃度計算

TG含量（mg/ mg prot）= (ΔA+0.0199)÷0.3261×V樣÷(Cpr×V樣）=3.07×（ΔA+0.0199）÷Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計算

TG含量（mg/ g 鮮重）=（ΔA+0.0199）÷0.3261×V樣÷(W×V樣÷V樣總）=3.07×（ΔA+0.0199）÷ W

V樣：加入樣本體積，0.01 ml；V樣總：加入試劑一體積，1 ml；W：樣本質(zhì)量，g；

Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml。

注意事項：

1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì)，實(shí)驗過(guò)程中需佩戴手套和口罩，試劑瓶蓋打開(kāi)后應該及時(shí)蓋緊。

2. 最低檢出限為100μg/ml。