測定意義：

肝酯酶是脂肪分解酶，在肝實(shí)質(zhì)細胞中合成，存在于肝臟竇周間隙內皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面，可促進(jìn)脂蛋白中的膽固醇向類(lèi)固醇激素轉化，血漿中的HL活性增高時(shí)，血漿中小顆?？蓪е?/span>LDL水平升高，加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。

測定原理：

肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚，可與固藍B鹽形成紫紅色偶氮化合物，在595nm有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內與肝酯酶活性成正相關(guān)。

組成：

自備儀器和用品：

天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計、1 ml玻璃比色皿。

樣品處理:

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g，加入1ml試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清待測。

2. 細胞：按照細胞數量（10⁴個(gè)）：試劑一體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細胞加入1ml試劑一）加入試劑一，冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后于4℃，10000g離心10min，取上清待測。

3. 血清：直接測定。

測定操作:

計算公式:

標準曲線(xiàn)：y= 0.1519 x -0.1241，R²=0.9994

1．按照蛋白濃度計算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。

HL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷（V樣×Cpr）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計算

酶活性定義：每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。

HL活性（μmol /min /g 鮮重）= （△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷W

3．按照細胞數量計算

酶活性定義：每10⁴個(gè)細胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。

HL活性（μmol /min /10⁴ cell）= （△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷（V樣×細胞數量÷V樣總）÷T

                                      = 6.58×（△A+0.1241）÷細胞數量

4．按照液體體積計算

酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。HL活性（μmol /min /ml）=（△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷V樣÷T

                                = 6.58×（△A+0.1241）

V反總：反應總體積，1ml；V樣：反應體系中加入樣本體積，0.1ml；W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應時(shí)間，10min