測定意義：

血清總鐵結合能力指血清轉鐵蛋白可結合鐵的能力，其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

測定原理：

Fe²⁺與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物，在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下，血清轉鐵蛋白可以與Fe³⁺結合，剩余未結合的Fe³⁺可以被還原成Fe²⁺，此時(shí)吸光度A1與未結合Fe³⁺數量正相關(guān)；酸化后，轉鐵蛋白結合的Fe³⁺釋放，并且進(jìn)一步被還原成Fe²⁺ ，此時(shí)吸光度A2與總Fe³⁺數量正相關(guān)。A2減A1與TIBC濃度呈正比。

組成：

試劑三：液體5ml×1瓶，4℃避光保存。（臨用前根據用量將A液和B液按1:1混合）

自備儀器和用品：

天平、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

測定操作表：

1、 分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長(cháng)至562nm。

2、操作表

血清總鐵結合力計算公式：

總鐵結合能力定義：37℃條件下，每升血清結合Fe³⁺的μmol 數。

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線(xiàn)：y=0.5478x+0.0281，R²=0.9981

總鐵結合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.5478×V反總÷V樣= 20.99×（ΔA-0.0281）

b. 用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線(xiàn)：y=0.2739x+0.0281，R²=0.9981

總鐵結合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.2739×V反總÷V樣= 41.98×（ΔA-0.0281）

V反總：反應總體積，0.46ml；V樣：反應中樣本體積，0.04ml

注意事項：

1. 吸光值大于0.8，樣品適當稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數。

2. 試劑二、試劑三有一定的毒性，操作時(shí)請做好防護措施。

3. 檢測限為4.78μmol/L。