用于豬脾臟、淋巴結、肉品、血液及血液制品中豬藍耳病毒核酸的檢測。

用法與判定：

使用病毒 DNA/RNA 核酸提取試劑盒提取核酸，按照如下步驟操作：

熒光 PCR 反應體系的配置：取出試劑盒中的各組分，置室溫（15-25℃）融化后瞬時(shí)離心，備用。每 次檢驗設陰、陽(yáng)性對照。設待檢樣品、陽(yáng)性對照和陰性對照的樣品總份數為 n，按如下反應體系配置：：

將以上配置的反應體系充分混勻后，按 25ul/管分裝至反應管中。分別取提取的核酸樣品 5ul 加入相

應反應管中，蓋緊管蓋后瞬時(shí)離心。

1.熒光 PCR 反應條件：

對于 ABI 熒光 PCR 儀，選擇 FAM 通道讀取檢測結果，淬滅基團選擇“MGB”；

對于其它品牌的熒光 PCR 儀，選擇 FAM 通道讀取檢測結果，淬滅基團選擇“None” 本產(chǎn)品使用特殊的 ROX Reference Dye，適用于所用 qPCR 儀器，無(wú)需在不同的儀器上調整 ROX 的

濃度。

2.試驗成立條件：陽(yáng)性對照 Ct 值≤35 并出現典型的擴增曲線(xiàn)，陰性對照無(wú) Ct 值或無(wú)典型的擴增曲 線(xiàn)，則判為試驗成立。

3.判定：待檢測樣品 Ct 值≤35 并出現典型的擴增曲線(xiàn)，判為陽(yáng)性；待檢樣品無(wú) Ct 值或 35＜Ct 值

≤40 并且無(wú)典型的擴增曲線(xiàn)，判為陰性。

注意事項

1.試劑盒應在-20℃以下保存和運輸。

2.本試劑盒僅用于科研檢測使用，操作人員必須經(jīng)過(guò)培訓，試劑盒使用前請仔細閱讀說(shuō)明書(shū)全文。

3.不要使用過(guò)期組分或者不同批次組分混合使用。

4.使用時(shí)盡量避免反復凍融，如凍融，應不超過(guò) 3 次。

5.樣品采集和處理過(guò)程應戴一次性手套，并及時(shí)更換，樣品間嚴禁交叉污染。

6.熒光 PCR 實(shí)驗嚴格分區操作，各區應有專(zhuān)用的手套、移液器等，不得交叉使用，避免污染；工作 人員應遵循單方向工作原則，各工作區相對隔離。

7.進(jìn)行熒光 PCR 實(shí)驗的工作桌面及相關(guān)物品應定期用 1%次氯酸鈉、75%酒精、1mol/L 鹽酸依次滅菌 和消毒，或定期用紫外燈滅菌和消毒。