工作原理：

本產(chǎn)品采用層析式雙抗體夾心法快速檢測核酸擴增產(chǎn)物。與傳統的瓊脂糖凝膠電泳檢測相比，核酸檢測試紙條操作簡(jiǎn)單，判讀迅速，不含有毒物質(zhì)，無(wú)需任何儀器設備。用戶(hù)僅需在第一個(gè)檢測序列引物設計時(shí)將一條引物/探針標記生物素Biotin，另一條引物/探針標記地高辛Digoxin，在第二個(gè)檢測序引物設計時(shí)將一條引物/探針標記生物素Biotin，另一條引物/探針標記異硫氰酸熒光素FITC或6-羧基熒光素6-FAM.在第三個(gè)檢測序引物設計時(shí)將一條引物/探針標記生物素Biotin，另一條引物/探針標記羅丹明TAMRA見(jiàn)下表。并確保兩種標記物可同時(shí)整合到雙鏈擴增產(chǎn)物上，即可使用本產(chǎn)品進(jìn)行檢測。如果采用內參設計，請將內參片段標記物設計為羅丹明。

標記方案：   1. 5’  Biotin-----5‘ Digoxin  

2. 5’ ’Biotin----5‘ FAM(FITC)

3. 5 ’Biotin----5‘ TAMRA

預期用途: 

核酸擴增產(chǎn)物的檢測。

包裝規格/貨號:

包裝規格：10條/包×5，鋁箔袋防潮包裝。

  圖1. 一次性核酸檢測試紙條結構示意圖

儲存條件及有效期:

儲存條件：存放于避光干燥處，儲存溫度4~30℃。

有效期：12個(gè)月。

操作步驟:

1. 根據檢測樣品數量取出相應數量的試紙條，并在吸收墊（圖1）上做好標記。每根試紙條只能用于單次、單個(gè)樣品的檢測。擴增產(chǎn)物體積為50~100µL時(shí)，可直接在200µL PCR反應管中檢測核酸產(chǎn)物，產(chǎn)物體積不足50µL時(shí)，需在PCR管內加超純水補足體積至50µL，吸打混勻后，才能進(jìn)行檢測。

2. PCR、RPA或RAA反應結束后，打開(kāi)PCR反應管，將試紙條結合墊端（箭頭端）插入PCR反應管（圖1），液面不得超過(guò)結合墊最上端，待判讀區全部浸潤（約需1～2min，外界環(huán)境溫度較低時(shí)，如冬季，會(huì )降低吸水速度，判讀區浸潤時(shí)間將會(huì )延長(cháng)），待質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）顯色后，可以將試紙條拿出。根據試紙條顯色情況直接讀取檢測結果。

3. 質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）顯色后10min內觀(guān)察結果，10min后判讀無(wú)效。

4. 記錄檢測結果，將試紙條密封丟棄在安全處。

結果判讀:

               圖2. 一次性核酸檢測試紙條結果判讀示意圖

1. 陽(yáng)性（+）：

試紙條出現一條藍色條帶,位于質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）;2條紅色條帶,位于檢測線(xiàn)（T線(xiàn)）。陽(yáng)性結果表明樣本中含有待檢測的核酸片段，且其數量≥試紙條的最低檢出量。當目的核酸產(chǎn)物濃度較低時(shí)，試紙條C線(xiàn)顯色呈藍色，T線(xiàn)呈淡紅色，甚至淺粉色條帶，該結果也應判定為陽(yáng)性。當目的核酸產(chǎn)物濃度較高時(shí)，試紙條C線(xiàn)顯色呈紅色，T線(xiàn)呈紅色，該結果也應判定為陽(yáng)性。

2. 陰性（-）：

試紙條質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）出現一條藍色條帶，檢測線(xiàn)（T線(xiàn)）沒(méi)有條帶。陰性結果表明樣本中不含目的核酸片段，或其數量低于試紙條的最低檢出量。

3. 無(wú)效：

試紙條質(zhì)控線(xiàn)（C線(xiàn)）和檢測線(xiàn)（T線(xiàn)）均未出現條帶，提示所用的試紙條或擴增試劑可能已經(jīng)損壞、失效或操作有誤。

此時(shí)，應仔細閱讀說(shuō)明書(shū)，重新擴增和檢測。如果問(wèn)題仍然存在，應立即停止使用同一批號的產(chǎn)品，并與當地供應商聯(lián)系。

注意事項及安全提示:

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。使用前請仔細閱讀說(shuō)明書(shū)，嚴格按照說(shuō)明書(shū)操作。違反或者未按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作可能導致錯誤結果。

2. 產(chǎn)品應依照說(shuō)明書(shū)要求，儲存于合適的環(huán)境和溫度下，并在有效期內使用。儲存不當或產(chǎn)品過(guò)期可能導致錯誤結果。打開(kāi)包裝后請盡快使用試紙條，以免因試紙條受潮影響試驗結果。檢測環(huán)境光線(xiàn)不足，操作者色弱等因素均可能能導致錯誤結果。

3. 使用完畢后，應盡快將紙條裝進(jìn)密封袋，妥善處理。本產(chǎn)品為一次性使用產(chǎn)品，請勿重復使用。

4. 收到該產(chǎn)品后，用該產(chǎn)品每個(gè)指標單獨檢測，每個(gè)指標擴增后都在準確的位置，并沒(méi)有假陽(yáng)性。再驗證該指標的引物體系的靈敏度。當2個(gè)指標處于同一個(gè)靈敏度水平后，用雙引物體系擴增。再用該產(chǎn)品檢測。