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    TwistDx重組酶聚合酶擴增 (RPA) 試劑技術(shù)原理

    RPA(重組酶聚合酶擴增)技術(shù)原理

    英國TwistDx公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術(shù)公司。該公司通過(guò)突破等溫DNA擴增,開(kāi)發(fā)的重組酶聚合酶擴增專(zhuān)利技術(shù)(RPA),被譽(yù)為DNA診斷領(lǐng)域的革命性創(chuàng )新。(http://www.twistdx.co.uk) 

    What is RPA?

    概念:重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱(chēng)為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。RPA技術(shù)主要依賴(lài)于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,最佳反應溫度在37°C左右。

    RPA技術(shù)原理:

    重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì )發(fā)生鏈交換反應形成并啟動(dòng)DNA合成,對模板上的目標區域進(jìn)行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過(guò)程進(jìn)行得非???,一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。


    Who uses RPA?

    以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產(chǎn)品,能夠在15分鐘內進(jìn)行常溫下的單分子核酸檢測該技術(shù)對硬件設備的要求很低,特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全、生物安全、農業(yè)等領(lǐng)域。


    TwistAmp? Basic 試劑盒可實(shí)現 DNA 擴增。包含 DNA 擴增所需的所有酶和試劑,用戶(hù)只需提供引物和模板。使用 TwistAmp? Basic 時(shí),即使 PCR 引物也有效。TwistAmp? Basic 已被用于固相、加尾引物、配基、電化學(xué)和微陣列等應用。

    非常適用于:終點(diǎn)凝膠電泳 DNA 檢測、下游應用(例如亞克?。?span>


    TwistAmp? exo 試劑盒可實(shí)現實(shí)時(shí)熒光 DNA 擴增。若想要以均相形式將 TwistDx RPA 擴增技術(shù)與 TwistDx 專(zhuān)利熒光 TwistAmp? exo 探針結合使用,則推薦使用本產(chǎn)品。用戶(hù)只需提供引物、探針和模板。更多信息請參閱手冊。

    非常適用于:實(shí)時(shí)熒光 DNA 檢測


    TwistAmp? nfo 試劑盒可實(shí)現橫向流動(dòng)檢測用 DNA 擴增。若想要通過(guò)終點(diǎn)夾心法(例如橫向流動(dòng) [LF] 試紙條)檢測有效 DNA 擴增反應的產(chǎn)物,則適合使用本產(chǎn)品。用戶(hù)只需提供引物、探針和模板。

    非常適用于:開(kāi)發(fā)低成本的現場(chǎng)側向層析檢測方法。

    包含凍干試劑的 TwistAmp? 試劑盒具有以下優(yōu)勢:

    RPA 擴增溫度要求低,允許使用低成本、便于攜帶的檢驗設備。

    RPA 試劑足夠穩定,可以在室溫下運輸。

    允許多種「適宜現場(chǎng)的」檢測輸出技術(shù),例如側向層析技術(shù)和熒光技術(shù)。

    RPA 對一些復雜樣本類(lèi)型表現出高度穩健性(即樣本耐受性),更適合于許多不同的現場(chǎng)實(shí)地應用。

    除了在現場(chǎng)實(shí)地使用中的優(yōu)勢,通過(guò) TwistAmp? 試劑盒還便于為許多應用和用途開(kāi)發(fā)出快速、特異且靈敏的 DNA RNA 檢測方法。


    TwistAmp? Liquid 是為了提供散裝液體形態(tài)的核心 RPA 組分,最終用戶(hù)能夠以不同的比例混合這些組分,以便用戶(hù)為各自的應用配制預混液*。

    TwistAmp? Liquid 具有以下優(yōu)勢:

    最終用戶(hù)可自由調整預混液制備量,而不再被局限于凍干試劑的固定體積

    最終用戶(hù)可自由調整反應體系中的組分比例,這使 RPA 試驗開(kāi)發(fā)工作具有更大的靈活性

    TwistAmp? Liquid Basic 是一款最適合用于凝膠分析或者作固相、加尾引物、適配體、電化學(xué)和微陣列應用的 DNA 擴增試劑盒。TwistAmp? Liquid exo 是一款用于以實(shí)時(shí)熒光檢測擴增反應的 DNA 擴增試劑盒。

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