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    Zymo品牌酵母相關(guān)產(chǎn)品專(zhuān)欄

    作為Zymo Research,我們的第一批產(chǎn)品旨在簡(jiǎn)化酵母研究,這就是我們現在商標上三個(gè)“萌芽酵母”的靈感來(lái)源。除了其他的酵母DNA和RNA純化技術(shù),我們還提供酵母生長(cháng)和轉化產(chǎn)品。對于酵母和真菌的轉化,一種獨特配方的YPD培養基(YPD Plus)將大多數酵母菌株的轉化效率提高了≥ 50%。我們的Frozen-EZ Yeast Transformation II試劑盒旨在使酵母轉化比傳統方法更簡(jiǎn)單、更高效。除此之外,我們還為酵母研究人員提供了幾種特殊產(chǎn)品,包括α因子/a因子交配信息素和5-氟乳清酸。酵母裂解酶和酵母蛋白試劑盒仍然分別是酵母裂解和蛋白純化的重要試劑。

    商品目錄
    酵母溶解酶
    1——Zymolyase-酵母裂解酶。
    酵母質(zhì)粒和DNA純化
    2——Zymoprep?酵母質(zhì)粒Miniprep I, II
    3——YeaStar?基因組DNA
    酵母轉化
    4——YPD Plus?
    5——Frozen-EZ酵母轉化II試劑盒
    酵母交配信息素
    6——α因子交配信息素
    7——a因子交配信息素
    特種化學(xué)品和其他
    8——5-FOA
    9——YeaStar? RNA 試劑盒
    10——酵母蛋白試劑盒

    1.Zymolyase-酵母菌的水解酶

    100T當量:從藤黃節桿菌中制備?;镜拿富钚允铅?1,3-葡聚糖酶和β-1,3-葡聚糖昆布淀粉酶。

     方便:提供凍干和存儲緩沖液,用于重組。

     高效的細胞壁消化:提供的存儲緩沖已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,以賦予最大水平的酶活性

    酵母和真菌細胞壁的消化是許多實(shí)驗過(guò)程所必需的,包括染色體制片、免疫熒光、轉化、蛋白質(zhì)純化等。裂解酶如酶解酶的使用通常用于消化。來(lái)自Zymo Research的酶解酶是從藤黃節桿菌中制備的,凍干,并與再懸浮緩沖液一起包裝。

    緩沖液已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,以賦予最大水平的酶活性。

    這種酶的主要活性是β-1,3葡聚糖酶和β-1,3葡聚糖昆布五糖水解酶,它們水解β-1,3葡聚糖鍵上的葡萄糖聚合物,釋放昆布五糖作為主要產(chǎn)物。最佳酶活性為30°~ 37°C;裂解活性在較高的溫度下停止。R-Zymolyase重組時(shí)含有0.5 U/μl RNase A。

    敏感真菌屬:阿氏囊霉屬、假絲酵母屬、德巴霉屬、假囊霉屬、內菌屬、漢遜酵母屬、漢遜酵母屬、克勒克酵母屬、克魯維酵母屬、斯達氏油脂酵母屬、梅奇酵母屬屬、畢赤酵母屬、普魯蘭屬、酵母屬、糖菌屬、糖菌屬、裂殖酵母屬、球擬酵母屬。

    酶解酶可用于酵母菌聚糖外殼和球質(zhì)體的酶解形成。箭頭指示球質(zhì)體的細胞核和細胞內成分通過(guò)部分消化的質(zhì)膜

    *資料來(lái)源:

    通過(guò)掃描電子顯微鏡(SEM)分離和可視化酵母細胞核的方案

    Elena Kiseleva, Terry D Allen, Sandra A Rutherford, Steve Murray, Ksenia Morozova, Fiona Gardiner, Martin W Goldberg & Sheona P Drummond.

    Nature Protocols 2, 1943 - 1953 (2007) Published online: 9 August 2007 doi:10.1038/nprot.2007.251

     

     

    產(chǎn)品

    貨號

    規格說(shuō)明

    規格表

    應用

    Zymolayse -酵母水解酶

    E1004

    1000U

    酶濃度5 U/μl總蛋白濃度:10 - 15mg /ml存儲:-70°C
    單位定義:一個(gè)分解單位(U)定義為10%在800nm處持續30min, od值下降

    原生質(zhì)球/原生質(zhì)體形成;酵母細胞融合;酵母轉化

    E1005

    2000U

    R-Zymolayse(與核糖核酸酶)

    E1006

    1000U

     

     2.Zymoprep?酵母質(zhì)粒小提取試劑盒I, II

    簡(jiǎn)單:快速,容易地從酵母中拯救質(zhì)粒。

    高效分離:適用于低拷貝和難以分離的質(zhì)粒

    高質(zhì)量:分離的質(zhì)粒DNA是分子生物學(xué)技術(shù)的理想選擇,如PCR,轉化,雜交等。

    Zymoprep?酵母質(zhì)粒小提取試劑盒提供了從釀酒酵母、白色念珠菌和酵母中分離質(zhì)粒所需的所有試劑和任何細胞壁對酵母菌裂解酶敏感的真菌。該程序簡(jiǎn)單高效,無(wú)需需要玻璃珠或苯酚??煽康貜慕湍妇?、平板貼片或液體培養中恢復質(zhì)粒DNA的。該系統是低拷貝數和難分離質(zhì)粒的理想選擇。洗脫后的質(zhì)粒DNA可直接用于大腸桿菌轉化,PCR和Southern blot分析。

     

     

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    說(shuō)明

    應用

    zymoprep?酵母質(zhì)粒 I

    D2001

    100Preps

    格式:異丙醇沉淀
    洗脫量:≥35μl
    處理時(shí)間:35 - 90分鐘
    DNA大小限制:≤23kb

    從酵母中回收質(zhì)粒

    zymoprep?酵母質(zhì)粒Miniprep II

    D2004

    50Preps

    格式:Spin-Column
    洗脫量:≥10μl
    處理時(shí)間:35 - 90分鐘
    綁定容量:5μg
    DNA大小限制:≤23kb

     3.YeaStar?基因組DNA試劑盒

    簡(jiǎn)單:快速旋轉柱程序產(chǎn)生純酵母基因組DNA,不使用玻璃珠或苯酚。

    多功能:有效的DNA分離從廣泛的真菌物種易感的酶解酶。

    高質(zhì)量:分離的基因組DNA可用于Southern blotting, PCR,限制性?xún)惹忻盖械取?/span>

          YeaStar?基因組DNA試劑盒設計用于可靠和高效地從廣泛的真菌基因組DNA分離包括煙曲霉、尼度曲霉、金黃色尼氏曲霉、白色念珠菌、畢赤酵母、釀酒酵母菌,裂聚糖酵母菌,以及任何細胞壁對酵母菌裂解酶敏感的真菌的該試劑盒基于高效酶解和Zymo-Spin?柱技術(shù)。每個(gè)標準液可產(chǎn)約7 - 20μg的DNA大小分布在35 - 60kb之間。得到的基因組DNA可以用于直接分析,包括Southern blotting, PCR,限制性?xún)惹忻赶取?/span>

      

    DNA的瓊脂糖凝膠電泳

    YeaStar?基因組DNA試劑盒線(xiàn):M: λ-DNA Hind III標記;

    1:美國酵母;2: p . pastoris;3:白念珠菌;4:美國非洲酒。

     

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    說(shuō)明

    應用

    YeaStar?基因組DNA試劑盒

    D2002

    40preps

    格式:Spin-Column
    綁定容量:25μg
    洗脫量:≥60μl
    處理時(shí)間:1.5小時(shí)

    酵母;Zymolayse-sensitive真菌;gDNA隔離

    4.YPD Plus

    最大化轉化效率:特殊配方的酵母生長(cháng)培養基增加酵母轉化效率提高50%。

    更好的結果:推薦用于突變酵母菌株,表現出不適合的生長(cháng)特性轉換。

    簡(jiǎn)單:只需補充酵母轉化反應混合物與YPD Plus?,以實(shí)現酵母的持續增加轉換效率。

          在酵母轉化協(xié)議的outgrowth步驟通常是提高整體酵母轉化效率的關(guān)鍵。這是有用的,當試圖最大化轉化效率的文庫篩選或轉化酵母與多重質(zhì)粒。YPD Plus?是一種特殊配方的酵母轉化效率提高> 50%。推薦使用YPD Plus?對于突變的酵母菌株,表現出不好的生長(cháng)特性,不易于轉化。只需補充酵母與YPD Plus?的轉化反應混合物,以實(shí)現酵母轉化效率的持續提高。

     

    YPD與Zymo Research的YPD Plus?培養基的比較。酵母在這兩

    種標準中都執行了轉換和生長(cháng)YPD或YPD Plus?介質(zhì)。轉化體的

    相對百分比如左邊的圖形。每個(gè)圖代表相對轉換效率從六個(gè)單獨

    的轉換取平均值。

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    應用

    酵母puls

    Y1003-50

    50ml

    酵母轉化和生長(cháng)

    Y1003-100

    100ml

    5.Frozen-EZ酵母轉化II?試劑盒

    快速:具有高轉化效率的酵母細胞可以在10分鐘內制備。

    簡(jiǎn)單:在不攜帶DNA的情況下,可以在≤1小時(shí)內轉化單個(gè)或多個(gè)質(zhì)粒的酵母。

    多功能:可用于釀酒酵母,以及其他真菌,包括白色念珠菌,絨球酵母和巴斯托拉斯酵母。兼容的有圓形和線(xiàn)性DNA。

           Frozen-EZ酵母轉化II?試劑盒旨在使酵母轉化和庫篩選更容易和更多比目前可用的方法有效。酵母細胞可立即轉化或存儲(即≤-70℃)稍后使用。用該試劑盒制備的酵母可以轉化環(huán)狀和線(xiàn)性dna。還有冰凍ez酵母Transformation II?試劑盒可用于其他真菌,包括白色念珠菌、絨球酵母和巴斯德氏酵母。

     

     

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    說(shuō)明

    應用

    Frozen-EZ酵母轉化II?試劑盒

    T2001

    120rxns

    轉換效率:105-106cfu /μg
    轉化DNA輸入:0.2 - 1.0μg
    活性細胞穩定性:-70°C條件下≥1年

    活性酵母細胞制備;

    相容性:S. cerevisiae, S。

    6.酵母α-因子(α-因子)交配信息素水溶液。

           當酵母“a”和“α”細胞遇到相反細胞類(lèi)型的交配信息素時(shí),它們會(huì )誘導交配所需的基因,G1的細胞周期受到抑制,細胞表面和核決定因子發(fā)生改變,并在梨中發(fā)生顯著(zhù)的形態(tài)伸長(cháng)形狀,親切地稱(chēng)為“閑談”。這些改變使酵母細胞為交配和融合形成穩定的二倍體做好準備。a/α二倍體對兩種類(lèi)型的交配信息素都不敏感,但可以通過(guò)營(yíng)養誘導進(jìn)行減數分裂剝奪。利用酵母交配信息素對細胞周期、細胞形態(tài)、轉錄等方面的研究具有開(kāi)創(chuàng )性意義誘導,以及信號轉導途徑。酶研究提供了α-因子肽交配信息素作為一種隨時(shí)可用的液體,已被優(yōu)化的兩種活性穩定性,并保證通過(guò)多次凍融循環(huán)保持生物功能。

     

    α-因子活性測定。α因子肽信息素(10 μl)作用于MATa細胞草坪上的無(wú)菌過(guò)濾器,分別為野生型BAR1 (200 μM,右)pro挑逗或BAR1 Δ (50 μM,左;5μM,中心)。敏感的α-因子明顯表現為清理區(G1逮捕了細胞)。BAR1蛋白酶缺失的細胞對α-因子的活性比bar -1蛋白酶陽(yáng)性的野生株高需要多20 - 50倍的信息素來(lái)阻止細胞。

    7.a-Factor Mating Pheromone

    酵母a因子(a因子)交配信息素水溶液

          a-因子是酵母中兩種交配信息素之一。它是交配信息素α-因子(alpha-factor)的“異性”。當酵母a和α細胞遇到相反的交配信息素時(shí),它們會(huì )誘導交配所需的基因,阻止細胞周期G1,改變細胞表面和核決定因子,并引起形態(tài)改變。

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    說(shuō)明

    應用

    α-Factor Mating Pheromone

    Y1001

    240ul

    分子量:1684.0

    活性試驗:G1阻滯

    純度:> 98%,HPLC

    儲存:-20°C

    酵母交配感應;G1期抑制

    a-Factor Mating Pheromone

    Y1004-500

    500ul

    分子量:1630

    活性試驗:G1阻滯

    純度:> - 80%,HPLC法測定

    存儲:-20°C

    8.5-Fluoroorotic酸(5-FOA)

    酵母菌遺傳反選擇劑:常用來(lái)固化酵母菌菌株的質(zhì)粒、質(zhì)粒改組、等位基因更換,雙混合屏幕。

    方便:可作為純粉末或現成的DMSO溶液。

    超純:通過(guò)薄層色譜(TLC)、熔點(diǎn)和批比測定> 98%。

           利用5-氟乳酸菌(5-FOA)進(jìn)行酵母反選擇是一種常用的遺傳篩選方法。固化酵母株質(zhì)粒、質(zhì)粒洗牌、等位基因置換和雙雜交篩選等方法都可以利用5-FOA。否則5-FOA對酵母無(wú)毒,在表達功能性URA3基因編碼的菌株中,5-FOA被轉化為毒性形式(即5-氟尿嘧啶)對于參與尿嘧啶合成的渥洛汀-5 ' -單磷酸脫羧酶。表型為Ura+的酵母菌株選擇后成為Ura-和5-FOAR。使用超純(> 98%)5-FOA粉末時(shí),由于其不溶性,研究者經(jīng)常提出5-FOA的溶解度問(wèn)題水。因此,我們在DMSO中提供了100倍濃度(100 mg/ml)的5-FOA溶液。這是經(jīng)過(guò)測試和驗證的基礎上計數器選擇活動(dòng)。

           使用5-FOA計數器選擇酵母。對尿嘧啶營(yíng)養不良的酵母菌(ura3-1)進(jìn)行了檢測在含有5-FOA的培養基上生長(cháng)的能力。檢測了三種菌株:單獨的wt (YZ1),帶有低拷貝率URA3的wt質(zhì)粒(YZ2),以及缺失一個(gè)不能失去補體的基本基因的突變株(ΔEG)URA3質(zhì)粒(YZ3)。從左到右,從上到下為合成完全葡萄糖培養基(SC): 1。SC,合成完全無(wú)5FOA;2.標準- SC-5-FOA (SC-5-FOA由超純5-FOA粉末制成,1克/升)SC-5-FOA由100X 5-FOA制成。 

    解決方案:

           對于每個(gè)平板,上面:酵母菌株:YZ1野生型,Ura- (wt, Ura- 3-52),右邊:酵母菌株:YZ2, wt攜帶低拷貝,URA3左圖:酵母株:YZ3: ΔEG,含互補質(zhì)粒(pRS316: EG, URA3, CEN)。的在所有含有5-FOA的培養基中,對菌株YZ3的反選擇都是明顯的,沒(méi)有明顯的5-FOAR菌落對照菌株YZ1和YZ2的細胞可以在5-FOA培養基上生長(cháng)。

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    說(shuō)明

    應用

    5-FOA(粉劑)

    F9001-1

    1g

    分子量:174.0;
    鑒別方法:薄層色譜法、熔點(diǎn)法和很多比較;
    純度:TLC估計98%,熔點(diǎn);

    批次比較溶解度:50mg/1ml(1:1 NH4OH:H2O)緩慢加熱,   > 100mg/ml DMSO
    儲存方式:冷凍保存

    酵母計數器選擇;酵母二者混合屏幕;質(zhì)粒固化;質(zhì)粒轉移;等位基因替換

    F9001-5

    5g

    100X 5-FOA(液體)

    F9003

    10ml

     

    9.YeaStar?RNA試劑盒

    簡(jiǎn)單:快速旋轉柱程序產(chǎn)生純酵母RNA,不使用玻璃珠或苯酚。

    多功能:有效的RNA分離從廣泛的真菌物種易感的酶裂解酶。

    高質(zhì)量:分離出的RNA適用于RT-PCR, northern blotting等

           YeaStar?RNA試劑盒能夠從廣泛的真菌中提取RNA,包括:煙曲霉,尼度曲霉,金黃色念珠菌,白色念珠菌,畢赤酵母,釀酒酵母菌,酵母。這個(gè)工具包非常適合從任何可以被酵母菌裂解酶分解的真菌中提純高質(zhì)量的總RNA。該試劑盒有助于使用創(chuàng )新的Zymo-Spin?柱技術(shù)從1-1.5 ml培養細胞中提純10-25份總RNA。

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    說(shuō)明

    應用

    YeaStar?RNA試劑盒

    R1002

    40Preps

    格式:旋轉列洗脫量:≥60μl

    綁定容量:25μg/prep

    大小限制:≥200 nt

    處理時(shí)間:30分鐘

    酵母;對酵母菌裂解敏感的真菌裂解酶(即發(fā)酵酶);核糖核酸隔離

     10.酵母蛋白試劑盒

    方便:快速有效的酵母菌裂解下游蛋白和DNA分析方法。

    多功能:程序適用于任何對酶解酶敏感的真菌物種。

    有效的球化:western blotting和PCR的理想方案。

           酵母蛋白試劑盒是一種簡(jiǎn)單、方便的方法。酵母菌細胞快速而徹底的裂解該試劑盒已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,用于釀酒酵母和白色念珠菌,但可以用于任何對酵母菌裂解酶(zymolyase)敏感的真菌種類(lèi)消化。消化過(guò)程可以有效地生成球質(zhì)體,這使得它們成為蛋白質(zhì)和DNA分析的理想選擇,分別包括Western blotting和PCR。

    產(chǎn)品

    貨號

    規格

    應用

    酵母蛋白試劑盒

    Y1002

    200preps

    酵母細胞溶菌作用;蛋白質(zhì)分析;DNA分析

     

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