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微管是由蛋白質(zhì)組成的管狀結構，是維持細胞形態(tài)的骨架。但是，微管蛋白不僅僅如此簡(jiǎn)單。如今對Tubulin蛋白以及微管的聚合與解聚的研究已經(jīng)成為當今癌癥研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。
Cytoskeleton Inc.是第一家為科學(xué)界提供生物活性微管蛋白、試劑盒和試劑的公司。我們持續提供微管蛋白試劑盒，可以幫助科研工作者高效地研究微管蛋白動(dòng)力學(xué)；從而提高科學(xué)生產(chǎn)力，同時(shí)節省研究人員寶貴的時(shí)間。
微管蛋白聚合檢測試劑盒
兩種常見(jiàn)的微管蛋白聚合檢測試劑盒類(lèi)型：
（1）基于熒光分析（DAPI熒光基團）的新型聚合分析方法（Fluorescence-based）
（2）基于吸光度（光散射）的經(jīng)典型分析方法（OD-based）
在大多數情況下，建議使用基于熒光分析的新型聚合分析方法，因為該種檢測方法具有高靈敏度、高效、高通量且性?xún)r(jià)比高等優(yōu)點(diǎn)。該方法是基于光散射原理，激發(fā)光透過(guò)微管會(huì )發(fā)生散射，其散射程度與微管聚合物的濃度在一定范圍內成正比。根據這一原理我們便能通過(guò)檢測樣品吸光度從而監測微管的聚合。
與微管蛋白相互作用的化合物或蛋白質(zhì)通常會(huì )改變聚合的一個(gè)或多個(gè)特征階段。如圖1所示，在標準聚合反應中加入抗有絲分裂聚合增強劑紫杉醇（Paclitaxel）后，可以觀(guān)察到濃度為3μM的紫杉醇可消除成核階段，提高生長(cháng)階段的Vmax值。因此，該分析方法的一個(gè)應用是鑒定新型抗有絲分裂劑。圖1還顯示了添加微管穩定藥物長(cháng)春堿（Nocodazole）的效果。在3μM的最終濃度下，長(cháng)春堿引起V-max的急劇下降和最終聚合物質(zhì)量的降低。
圖1. 使用基于熒光分析法的微管蛋白聚合檢測試劑盒（BK011P）進(jìn)行。Tubulin分別與Paclitaxel和Vinblastine反應，且設置另一個(gè)單獨孵育Tubulin作為對照組。每個(gè)條件都進(jìn)行了重復的測試。聚合反應在360 nm下激發(fā)，420 nm發(fā)射。實(shí)驗結果表現為聚合曲線(xiàn)，該曲線(xiàn)將聚合過(guò)程分為3個(gè)階段：成核期，生長(cháng)期，和穩態(tài)期。
部分相關(guān)熱門(mén)試劑盒：
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Tubulin生化試劑盒名稱(chēng) |
貨號 |
規格 |
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Tubulin Polymerization Assay Biochem Kit?>97% Pure Porcine Brain Tubulin, OD Based |
24-30 Assays |
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Tubulin Polymerization Assay Biochem Kit?>99% Pure Porcine Brain Tubulin, OD Based |
24-30 Assays |
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Tubulin Polymerization Assay Biochem Kit?>99% Pure Porcine Brain Tubulin, Fluorescence based |
96 Assays |
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Microtubule Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit? |
30-100 Assays |
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Microtubule / Tubulin In Vivo Assay Biochem Kit?Quantitates in vivo ratio of tubulin polymers & monomers |
30-100 Assays |
純化的微管結合蛋白(MAPs)和馬達蛋白（Motors）
微管結合蛋白 ( Microtubule Associated Proteins，MAP) 是與微管或微管蛋白可以相互作用的蛋白質(zhì)。通過(guò)與微管的相互作用，MAP 蛋白執行一系列功能，包括微管的動(dòng)態(tài)控制、沿微管運輸、協(xié)助細胞運動(dòng)和塑性，以及一系列其他的功能。
如常見(jiàn)的MAP1、MAP2和Tau蛋白在中樞神經(jīng)系統組織中表達，且有助于穩定微管的結構。馬達蛋白（Motor）也可以被分類(lèi)為MAP蛋白，但通常被稱(chēng)為驅動(dòng)蛋白（Kinesin）或動(dòng)力蛋白（Dynein）。細胞骨架專(zhuān)家Cytoskeleton公司提供的MAP相關(guān)蛋白是從富含MAP的tubulin蛋白中分離出來(lái)的，這種tubulin蛋白主要含有MAP2，但也含有少量的MAP1、MAP4和Tau蛋白。Cyto還提供來(lái)自腦組織的Tau蛋白，Tau蛋白有四種常見(jiàn)的亞型。
部分相關(guān)熱門(mén)MAPs蛋白及Motors蛋白：
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產(chǎn)品 |
來(lái)源 |
純度 |
貨號 |
規格 |
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Eg5 Homolog BimC Motor Domain Protein |
A. nidu- lans |
>85% |
2 x 25 μg |
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Chromokinesin Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 μg |
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Eg5 Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 μg |
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10 x 25 μg |
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1 x 1 mg |
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Eg5 Homolog BimC Motor Domain Protein |
A. fumiga- tus |
>85% |
2 x 15 μg |
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KIFC3 Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 μg |
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KIF3C Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 μg |
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Kinesin Heavy Chain Motor Do- main Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 μg |
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1 x 1 mg |
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MCAK Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 μg |
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MKLP1 Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 μg |
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1 x 1 mg |
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Tau ProteinBovine brain |
Bovine Brain |
>90% |
1 x 50 μg |
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3 x 50 μg |
圖2. Pre-Formed Microtubules (Cat.# MT002) 微管是馬達驅動(dòng)蛋白的底物，馬達驅動(dòng)蛋白在細胞內參與很多的驅動(dòng)活動(dòng)。馬達驅動(dòng)蛋白被證明可以承載著(zhù)如染色體和囊泡的載體沿著(zhù)微管軌道移動(dòng)。下圖所示的Pre-Formed Microtubules（Cat.#MT002）是馬達驅動(dòng)蛋白的底物之一，這個(gè)蛋白與Kinesin Enzyme Linked Inorganic Phosphate ATPase Kit (Cat. #BK060)同時(shí)使用，可以用于檢測MAPs。
Tubulin免疫熒光（IF）呈象工具
Cytoskeleton公司提供亮度高且性質(zhì)穩定的微管蛋白活細胞呈象工具，如熒光標記微管蛋白，SiR, SiR700和SPY?探針。
Cyto公司的熒光標記微管蛋白具有高純度和高生物活性的特點(diǎn)，用熒光微管蛋白工具來(lái)進(jìn)行微管動(dòng)力學(xué)實(shí)驗，使用
我們的熒光小管蛋白和Spirochome的SiR、SiR700和SPY?探針，提供了明亮和穩定的微管蛋白活細胞成像工具。細胞骨架的熒光管蛋白純度高，高度公開(kāi)，具有生物活性。利用熒光微管蛋白工具研究微管動(dòng)力學(xué)，利用Spirochrome探針觀(guān)察活細胞中的微管蛋白。
圖3.
部分相關(guān)熱門(mén)熒光標記Tubulin蛋白：
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產(chǎn)品 |
Ex / Em wavelength |
來(lái)源 |
純度 |
貨號 |
規格 |
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AMCA Labeled Tubulin |
350 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 μg |
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440 +/-20 nm |
20 x 20 μg |
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HiLyte Fluor? 488 Labeled Tubulin |
460 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 μg |
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520 +/-20 nm |
20 x 20 μg |
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TRITC Rhodamine Labeled Tubulin |
535 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 μg |
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590 +/-20 nm |
20 x 20 μg |
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X-Rhodamine Labeled Tubulin |
560 +/- 20 nm |
Bovine Brain |
>99% |
5 x 20 μg |
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620 +/- 20 nm |
20 x 20 μg |
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HiLyte Fluor? 647 Labeled Tubulin |
620 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 μg |
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670 +/-20 nm |
20 x 20 μg |
Spirochrome的活細胞染色探針可通過(guò)細胞膜的物質(zhì)，并可以對微管蛋白進(jìn)行染色。與SiR和SiR700染料相比，SPY?具有亮度更高、細胞毒性更低的特點(diǎn)，無(wú)需基因操作或過(guò)表達即可對微管進(jìn)行染色
圖4. 左圖：在Matrigel基質(zhì)膠中，用SIR-Tubulin（紅色）對MCF10A細胞中表達的H2B-GFP基因(藍色)進(jìn)行染色；右圖：用共聚焦顯微鏡與STED顯微鏡成像的SPY?染料標記的HeLa細胞相比較。
部分熱門(mén)活細胞呈象工具：
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產(chǎn)品名 |
Ex/Em |
貨號 |
規格 |
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SiR-Tubulin? KitIncludes SiR-Tubulin, and Verapamil |
630 / 680 nm |
50 nmol |
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Cytoskeleton KitIncludes SiR-Actin, SiR-tubulin andVerapamil |
630 / 680 nm |
50 nmol each |
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SiR700-Tubulin KitIncludes SiR700-Tubulin and Verapamil |
690 / 720 nm |
35 nmol |
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SPY555-TubulinIncludes SPY555-Tubulin |
555 / 580 nm |
100 stains |
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SPY650-TubulinIncludes SPY650-Tubulin |
652 / 674 nm |
100 stains |
純化的微管蛋白
對于一般的研究目的，推薦適用來(lái)自腦組織的微管蛋白（純度大于99%）（# T240）。這是一種用于微管結合研究和微管聚合分析的高通量底物。其他更專(zhuān)門(mén)的微管蛋白包括來(lái)自癌癥細胞的微管蛋白，適用于藥物篩選，以及來(lái)自植物或真菌來(lái)源的微管蛋白，它們分別適用于不同領(lǐng)域。
部分熱門(mén)純化微管蛋白：
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產(chǎn)品名 |
來(lái)源 |
純度 |
貨號 |
規格 |
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Tubulin Protein Lyophilized (no glycerol) |
Porcine Brain |
>99% |
1 x 1 mg |
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5 x 1 mg |
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20 x 1 mg |
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1 x 10 mg |
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Tubulin Protein, MAP rich |
Porcine Brain |
70% tubulin 30% MAPs |
1 x 1 mg |
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5 x 1 mg |
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1 x 10 mg |
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Tubulin for HTS Applications |
Porcine Brain |
97% |
1 x 4 mg |
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1 x 40 mg |
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Tubulin Protein |
Porcine Brain |
>99% |
1 x 1 mg |
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5 x 1 mg |
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20 x 1 mg |
關(guān)于Cytoskeleton
Cytoskeleton作為專(zhuān)業(yè)的細胞骨架和小G蛋白相關(guān)產(chǎn)品的生物科技公司，可以提供專(zhuān)業(yè)且高度可靠的Pulldown和GLISA檢測試劑盒，在過(guò)去的20年里，無(wú)數各個(gè)領(lǐng)域的研究人員已經(jīng)利用Cytoskeleton的產(chǎn)品產(chǎn)出許多優(yōu)秀的實(shí)驗成果。
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