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快閃核酸釋放劑
貨號 | BT6008 | 售價(jià)(元) | 1500 |
規格 | 1ml | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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產(chǎn)品信息
貨號 |
名稱(chēng) |
規格 |
價(jià)格 |
BT6008 |
快閃核酸釋放劑 |
1ml |
1500 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本釋放劑可用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等動(dòng)物樣品,或根、莖、葉、花、種子等植物樣品的核酸(DNA、RNA均可)提取、富集、純化等步驟,核酸釋放劑處理后的裂解產(chǎn)物可直接用于Marathon DNA Polymerase(BT0016)的PCR擴增,RPA核酸擴增試劑盒,RT RPA核酸擴增試劑盒和RPA核酸擴增試劑盒(試紙條法)的等溫擴增。無(wú)須添加溶菌酶、溶葡萄球菌素或蛋白酶K等酶制劑,也無(wú)須使用酚、氯仿等有害化學(xué)試劑。一步、單管操作,方便快捷,操作時(shí)間不足1 min。靈敏度高,重現性好。用本試劑盒處理后,取1~15μL裂解產(chǎn)物上清液做模板進(jìn)行PCR,可穩定擴增添加量為10的1次方拷貝的靶基因??捎糜谑称钒踩?、疾控、突發(fā)傳染病、動(dòng)物疫情、分子診斷、精準用藥基因檢測前的樣品處理。
步驟:
1.動(dòng)物樣本
全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等樣品經(jīng)適當處理后,按快閃核酸釋放劑(BT0068):液體樣品=1:7的比例與待檢樣本混合即可。當樣品濃度較低時(shí),建議裂解體系≥ 50 μL,即可確保證裂解產(chǎn)物內含有可檢出的足量核酸樣品。
混合后的溶液用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后,吸取上清液至一干凈的離心管內,待檢。
PCR、RPA或RT RPA擴增時(shí),裂解產(chǎn)物上清液可加至反應體系允許的最大添加量。
2.植物樣本
待檢材料經(jīng)簡(jiǎn)單沖洗后,剪成2~5mm見(jiàn)方的小塊或小段,加入100μL的快閃核酸釋放劑(BT6008),并以槍頭碾壓待檢材料數次,對樣本進(jìn)行簡(jiǎn)單的破碎處理后,用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后,吸取上清液至一干凈的離心管內,待檢。
PCR、RPA或RT RPA擴增時(shí),可吸取1μL的裂解產(chǎn)物上清液進(jìn)行檢測即可。
擴增體系中裂解產(chǎn)物的添加量:如出現待檢樣品、陽(yáng)性對照及陰性對照樣品裂解后的檢測結果與實(shí)際不符的情況,可按裂解產(chǎn)物添加體積±2μL的梯度設置平行試驗,確定同一擴增體系內裂解產(chǎn)物體積不同添加量對樣品、陽(yáng)性對照及陰性對照的檢測情況是否有影響,在確保陽(yáng)性對照檢測結果為陽(yáng)性,陰性對照檢測結果為陰性的情況下,選取最大的裂解產(chǎn)物添加量。因快閃核酸釋放劑具有抑制非特異性擴增的作用,在陰性對照均檢測為陰性,陽(yáng)性對照均檢測為陽(yáng)性的情況下,可按擴增體系的最大添加樣品添加體積添加裂解產(chǎn)物。
注意事項:
1.本釋放劑用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等樣品的核酸提取時(shí),應盡量在樣本采集后立刻完成樣本處理。如條件不允許,應以冷藏或冷凍方式運輸樣本。
2.如用于傳染性疾病樣本檢測時(shí),操作時(shí)需注意安全防護,應在規定的實(shí)驗場(chǎng)所進(jìn)行,穿戴防護衣物、一次性手套和口罩等;所有直接接觸過(guò)病原物樣品的物品應消毒后再丟棄或再次使用。
3.本釋放劑目標為動(dòng)物液體樣本的快速粗處理,處理物可用于Marathon DNA Polymerase(BT0016)的PCR擴增,RPA核酸擴增試劑盒,RT RPA核酸擴增試劑盒和RPA核酸擴增試劑盒(試紙條法)的等溫擴增。處理物不可用于紫外分光光度定量等對核酸純度要求較高的實(shí)驗。
4.快閃核酸釋放劑(BT6008)裂解樣品時(shí),快閃核酸釋放劑(BT6008)為8×溶液,裂解體系為快閃核酸釋放劑(BT6008):液體樣本=1:7,該比例經(jīng)反復優(yōu)化,切勿隨意調整!
5. PCR、RPA或RT RPA擴增時(shí),處理物上清液可加至反應體系允許的最大添加量。擴增模板為DNA時(shí),-20℃保存的處理液上清液可于24 h內多次、重復使用。PCR或RPA反應的成功,與引物設計、循環(huán)參數或擴增時(shí)間設置密切相關(guān)。如使用本試劑盒處理樣品后,擴增失敗,請確認用其它方法提取核酸的PCR或RPA反應是否成功。
6.本試劑僅用于科研用途,請勿用于臨床、食品等。
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