產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

LysoSensor?系列探針是主要對活細胞中的酸性區室（如溶酶體、頂體精子）動(dòng)態(tài)合成和功能進(jìn)行研究的一類(lèi)熒光探針，該類(lèi)探針的染色具有向酸性，可通過(guò)質(zhì)子化作用在酸性細胞器內累積。該類(lèi)探針的這種質(zhì)子化作用還可解除染料的熒光淬滅性，使其所發(fā)射的熒光強度更強。因此，與LysoTracker系列探針相比，LysoSensor?系列探針隨著(zhù)細胞器的酸化程度其熒光強度呈pH依賴(lài)型(向酸)增強。

LysoSensor Blue DND-167可用于測量酸性細胞器（如溶酶體）的pH。LysoSensor染料在酸性環(huán)境中會(huì )發(fā)出更多的熒光。LysoSensor Blue DND-167 的pK a為?5.1。本品以溶于無(wú)水DMSO的1 mM儲存液形式提供。

如對活細胞中的酸性區室進(jìn)行選擇性標記和染色，可選擇LysoTracker?系列探針。

產(chǎn)品性質(zhì)

分子式（Molecular Formula）：C 24 H 28 N 2 O 2

分子量（Molecular Weight）：376.4974

Ex/Em：373?425nm

pKa：～5.1

顏色（Color）：藍色

步驟說(shuō)明

使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進(jìn)行簡(jiǎn)短離心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作濃度需根據不同的實(shí)驗要求、細胞類(lèi)型、細胞或組織的膜通透性等進(jìn)行優(yōu)化。

1. 工作液的配制

利用培養基或合適的緩沖液將1 mM 儲存液稀釋至工作濃度，推薦工作液濃度至少為1 μM；

注1：為了降低探針加載過(guò)度可能引起的假陽(yáng)性，建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。2）若細胞在染色后于不含染料的培養基中孵育，會(huì )觀(guān)察到熒光信號的衰減和細胞的空泡化現象。

注2：工作液現配現用。

2. 染色

2.1 對于貼壁細胞

1）將細胞置于培養皿中的蓋玻片上，加入合適培養基，使其爬片生長(cháng)。

2）待細胞生長(cháng)到合適豐度，吸除培養液，加入適量37℃預熱的含探針工作液。于生長(cháng)狀態(tài)下孵育30 min～2 h（具體孵育時(shí)間需根據細胞類(lèi)型而定）。

3）利用新鮮培養基替換上述染色液并在熒光顯微鏡（含合適濾片）下觀(guān)察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或延長(cháng)染色時(shí)間。

2.2 對于懸浮細胞

1）離心，吸除上清。

2）利用37℃預熱的探針工作液重懸細胞，于生長(cháng)狀態(tài)下孵育30 min～2 h（具體時(shí)間需根據細胞類(lèi)型而定）。

3）離心，吸除染色液，加入新鮮培養液重懸細胞。

4）置于熒光鏡下觀(guān)察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或加長(cháng)染色時(shí)間。

注：對于懸浮細胞，也可將細胞貼附于經(jīng)BD Cell-Tak處理過(guò)的蓋玻片上，然后使用類(lèi)似于貼壁細胞的方法進(jìn)行染色。

注意事項

1）不能儲存在無(wú)霜冰箱，建議按照單次用量分裝于-20℃凍存。

2）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

運輸和保存方法

冰袋運輸。-20℃避光干燥保存，避免反復凍融，有效期6個(gè)月。

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