產(chǎn)品信息

      美國List Labs公司是世界著(zhù)名的科研毒素試劑供應商，其產(chǎn)品包括難辨梭狀芽孢桿菌毒素A、B，志賀氏毒素，霍亂毒素，炭疽毒素（PA、LF、EF），百日咳毒素，白喉毒素，CRM197，破傷風(fēng)毒素，葡萄球菌腸毒素B，肉毒毒素，脂多糖（LPS），內毒素等各類(lèi)毒素，此外也提供相應的毒素抗體與類(lèi)毒素，包括破傷風(fēng)類(lèi)毒素與難辨梭狀芽孢桿菌毒素A、B類(lèi)毒素。

      百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）是一種由6個(gè)非共價(jià)連接亞基組成的多元件蛋白，分子量范圍約為9-28kDa，這些亞基分別命名為 S1，S2，S3，S4和S5，天然百日咳毒素中所占比為1:1:1:2:1，其中S4亞基以2倍形式存在。大亞基為S1（也稱(chēng)為A啟動(dòng)子），包含 NAD+糖基水解酶和ADP-核糖基轉移酶活性。單獨的A啟動(dòng)子能夠將NAD+的ADP核糖轉移到Gαi，Gαo或Gαt家族G蛋白的α亞基。PTX的結 晶結構顯示其呈金字塔形狀，A啟動(dòng)子位于塔尖，中間是S5，底端是二個(gè)二聚體，分別是S2-S4,和S3-S4。這5個(gè)亞基統稱(chēng)為B寡聚體亞基 （S2，S3，S4，S4和S5），允許PTX進(jìn)入大部分細胞，使其粘附在包括TLR4和糖蛋白Ib在內受體蛋白的多糖殘基上。通過(guò)受體介導的內 吞作用進(jìn)入細胞后，PTX通過(guò)胞內體途徑和高爾基體復合物逆向轉運進(jìn)入內質(zhì)網(wǎng)。A啟動(dòng)子從PTX上釋放出來(lái)，穿透內質(zhì)網(wǎng)膜并導致目標 膜偶聯(lián)的G蛋白失活。

      百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）由Bordetella pertussis代謝純化所得，一種多亞基毒素，與大多數哺乳動(dòng)物培養細胞結合并特 定靶向G蛋白，抑制G蛋白及其在信號通路中的生理功能。PTX的生理效應因G蛋白功能不同而變化。正是依賴(lài)Gi家族的蛋白偶聯(lián)受體來(lái)抑 制信號通路的能力，PTX是細胞生物學(xué)研究中的一種重要工具。PTX通過(guò)抑制和調節各種宿主對Bordetella pertussis的免疫反應在傳染 方面發(fā)揮重要作用。鼠類(lèi)動(dòng)物模型中PTX還能用來(lái)刺激建立實(shí)驗性自身免疫疾病，比如實(shí)驗性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型。

基本參數：

CAS NO：82248-93-9

純度：>95%

生物活性：

CHO細胞實(shí)驗—依照Hewlett et al.方法，產(chǎn)生陽(yáng)性反應（CHO簇聚生長(cháng)模式）所需PTX的低濃度為0.03ng/ml；依批次不同而有變 化。

腺苷酸環(huán)化酶實(shí)驗：依照Wolff et al方法，在含1 μM鈣調蛋白的體系中，PTX的腺苷酸環(huán)化酶活性是9 picomoles/min/μg。依照 批次不同會(huì )有差異。

主要應用： PTX常與MOG（35-55），PLP（139-151），PLP（178-191）等免疫肽聯(lián)合注射動(dòng)物，從而建立實(shí)驗性自身免疫性腦脊髓炎 （Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型，即用來(lái)研究多發(fā)性硬化癥（Mutiple sclerosis，MS）的常用動(dòng)物模 型。

List labs提供三種配方形式的百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX），分別是甘油溶液（貨號：listlabs 179），溶于緩沖液的凍干粉（貨號： listlabs 180），以及溶于純水的凍干粉（貨號：listlabs 181）。三種形式的百日咳毒素。

白喉毒素在構建細胞特異性細胞毒性免疫毒素中可用作毒素元素。具有天然內體逃逸機制的細菌毒素易位結構域已被用于開(kāi)發(fā)有效的非病毒載體用于基因治療。

Biochem/physiol Actions

通過(guò)催化真核氨基轉移酶1的ADP-核糖基化抑制蛋白質(zhì)合成。

Physical form

含Tris和EDTA的凍干粉。

Reconstitution

當用無(wú)菌蒸餾水將每管重懸至0.5mL時(shí),0.01 M Tris和0.001M Na2EDTA, pH 7.5

中含有~1mg的白喉毒素。

180 和181 都是凍干粉。180 是凍干的時(shí)候：緩沖液里含有：０.０１Ｍ的磷酸鹽緩沖液和０.０５Ｍ的Ｎacl,所以?xún)龈沙煞勰┖?，里面還有緩沖液的鹽成分。181凍干的時(shí)候，不含鹽成分。區別就是：凍干粉180含鹽成分，181不含鹽成分。溶解的時(shí)候，直接用ddH2O 溶解就可以。在使用上沒(méi)有區別。