測定意義：

血鈣幾乎全部存在于血漿中，所以血鈣主要指血漿鈣。血漿鈣有離子鈣和結合鈣兩種形式，其中只有離子鈣直接起生理作用，它與結合鈣處于動(dòng)態(tài)平衡，并受血液pH的影響。血鈣水平與多種重要的生理功能相關(guān)，過(guò)高或過(guò)低都會(huì )影響正常生理功能。本試劑盒用于檢測血液中游離鈣濃度。

測定原理：

在強堿溶液中游離鈣與GBHA反應生成紅色鈣-GBHA復合物，在520nm有吸收峰；通過(guò)測定520nm吸光度，計算游離鈣濃度。

組成：

試劑三：液體×1瓶（空瓶，試劑自備）。取10ml試劑瓶。依次加入9ml無(wú)水甲醇和1ml丙酮，蓋緊混勻即可。

標準液：液體×1瓶，0.3μmol/ml，4℃保存。

自備儀器和用品：

可調式移液槍、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、石英比色皿/96孔板、無(wú)水甲醇、丙酮和蒸餾水。

血鈣濃度測定操作：

1. 分光光度計預熱30min以上，調節波長(cháng)到520nm，蒸餾水調零。

2. 空白管：取石英比色皿/96孔板，依次加入蒸餾水12 μl，試劑一50μl，混勻；再加入試劑二50μl，混勻；最后加入試劑三100μl，混勻；靜置5min后于520 nm測定吸光度A空白管。做一個(gè)空白管即可。

3. 標準管：取石英比色皿/96孔板，依次加入標準液12μl，試劑一50 μl，混勻；再加入試劑二50μl，混勻；最后加入試劑三100μl，混勻；靜置5min后于520 nm測定吸光度A標準管。做一個(gè)標準管即可。

4. 測定管：取石英比色皿/96孔板，依次加入血液樣品12μl，試劑一50 μl，混勻；再加入試劑二50μl，混勻；最后加入試劑三100μl，混勻；靜置5min后于520 nm測定吸光度A測定管。記為A測定管。

注意：空白管和標準管只需測定一次。

血鈣濃度計算公式：

血鈣含量(μmol /dL)= [C標準液×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]×V樣品總

=30×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)

C標準液：0.3μmol/ml； V樣總：樣品總體積，1 dL=100ml。

注意事項：

1、宜早晨空腹采血，并且采血后應該盡快完成測定。

2、靜置5分鐘后立即測定。

3、加試劑三后，應該在30 min內完成該管的測定。

4、最低檢出限為1mmol/L。