測定意義：

血清鐵是指血液中轉鐵蛋白所結合的鐵，該指標常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血。

測定原理：

亞硫酸鈉還原血清Fe³⁺生成成Fe²⁺，Fe²⁺進(jìn)一步與2, 2’- 聯(lián)吡啶顯色，在520nm處有吸收峰，測定該波長(cháng)光吸收值即可計算血清鐵含量。

組成：

試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前配制，加入20 ml蒸餾水充分溶解。

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前配制，加入625μl冰醋酸，加入20 ml蒸餾水充分溶解。

標準液：液體1ml×1支（EP管），10 μmol/L Fe³⁺標準液，4℃保存。

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計、離心機、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、冰醋酸、氯仿和蒸餾水。

測定：

1. 分光光度計預熱30 min，調節波長(cháng)到520 nm，蒸餾水調零。

2. 標準液解凍：提前取出標準液，置于室溫下充分解凍后混勻。

3. 空白管：取EP管，依次加入400 μl蒸餾水，400 μl試劑一，400 μl試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入200 μl氯仿（自備），充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液700 μl，加入1ml玻璃比色皿，于520 nm測定吸光度，記為A空白管。

4. 標準管：取EP管，依次加入400 μl標準液，400 μl試劑一，400 μl試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入200 μl氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液700 μl，加入1ml玻璃比色皿，于520 nm測定吸光度，記為A標準管。

5. 測定管：取EP管，依次加入400 μl血清，400 μl試劑一，400 μl試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入200 μl氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液700 μl，加入1ml玻璃比色皿，于520 nm測定吸光度，記為A測定管。

注意：空白管和標準管只需測定一次。

血清鐵濃度計算公式：

血清鐵含量(μmol /dL)=[C標準液×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]×V總

= (A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)

C標準液：10 μmol/L Fe³⁺標準液；V總：標準液總體積1ml；1 dL=0.1 L。

注意事項：

1、血清鐵含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被鐵污染。

2、試劑一和試劑二溶液不穩定，需現配現用，新配制的試劑當天使用完畢。

3. 最低檢出限為1μmol/L。