• <tt id="2eeee"></tt>

    歡迎蒞臨南京沃博生物科技有限公司官方網(wǎng)站!

    羧酸酯酶(CarE)檢測試劑盒(微量法 100T/96S)

    貨號 SH0614 售價(jià)(元) 756
    規格 100T/96S CAS號
    • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
    • 相關(guān)產(chǎn)品

    貨號

    名稱(chēng)

    規格

    SH0614

    羧酸酯酶(CarE)檢測試劑盒(微量法 100T/96S)

    100T/96S

    正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本做預測定                                             

    測定意義:

    哺乳動(dòng)物CarE,也稱(chēng)脂族酯酶(aliesterase),廣泛分布于組織和器官,屬于絲氨酸水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內源性與外源性物質(zhì)水解,但不能催化水解乙酰膽堿及其類(lèi)似物。CarE參與脂質(zhì)運輸和代謝,并且與多種藥物、環(huán)境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關(guān),有機磷農藥可結合并且抑制CarE活性。

    測定原理:

    CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固籃顯色;在450 nm光吸收增加速率,計算CarE活性。

    組成:

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    SH0614-100T/96S

    Storage

    試劑一:液體

    1

    4℃

    試劑二:液體

    15ml×2

    4℃

    試劑三:粉劑

    2

    4℃

    試劑:粉劑

    2

    -20℃

    說(shuō)明書(shū)

    一份

     

    試劑三:粉劑×2支, 4℃保存,臨用前取1支試劑三,加0.6ml無(wú)水乙醇充分溶解;

    試劑四:粉劑×2支,-20℃保存,臨用前取1支試劑四,加少量試劑二溶解;

    工作液配制:臨用前配制,向1瓶試劑二中,加入溶解后的試劑三和試劑四各1支,充分溶解,過(guò)濾,4℃避光保存,可用1周。

    自備儀器和用品:

    可見(jiàn)分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

    粗酶液提?。?/span>

    細菌、細胞樣品制備

    收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每200萬(wàn)細菌或細胞加入400μl試劑一,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次);12000g 4℃離心30min,取上清液待測。

    2、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(ml)15~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1ml試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿;12000g 4℃離心30min,取上清液待測。

    3、液體:直接測定

    測定操作:

    1. 分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長(cháng)到450 nm,蒸餾水調零。

    2. 試劑二置于37℃水浴中預熱30 min。

    3. 空白管:取微量玻璃比色皿/96孔板,依次加入5μl蒸餾水和200μl試劑二,迅速混勻,于450nm處測定3min內吸光值變化,第10s吸光值記為A1,第190s吸光值記為A2。△A空白管=A2-A1

    4. 測定管:取微量玻璃比色皿/96孔板,依次加入5μl上清液和200μl試劑二,迅速混勻,于450nm處測定3min內吸光值變化,第10s吸光值記為A3,第190s吸光值記為A4。△A測定管=A4-A3

    注意:空白管只需測定一次。

    CarE活性計算公式:

    a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

    1、組織中CarE活性

    (1) 按蛋白濃度計算

    CarE活性單位定義:mg組織蛋白在37反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為1個(gè)酶活單位。

     

    CarE酶活(U/mg prot)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總÷(Cpr×V)÷T

    = 13.67×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr

    (2) 按樣本鮮重計算

    CarE活性單位定義:g組織在37反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為1個(gè)酶活單位。

    CarE酶活(U/g 鮮重)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總×V樣總÷V樣)÷W÷T

    =13.67×(△A測定管-△A空白管)÷W

    2、細菌或細胞中CarE活性

    CarE活性單位定義:1萬(wàn)個(gè)細菌或細胞在37反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為一個(gè)CarE活性單位。

    CarE酶活(U/104 cell)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總×V樣總÷V樣)÷細胞密度(104 cell/ml÷T=13.67×(△A測定管-△A空白管細胞密度(104 cell/ml

    3、液體中CarE活性

    CarE活性單位定義:每毫升樣品在37℃反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為1個(gè)酶活單位。

    CarE酶活(U/ml )= (△A測定管-△A空白管) ×V反總÷V÷T

    =13.67×(△A測定管-△A空白管)

    V反總:反應體系總體積,205μl=2.05×10-4L;V樣總:上清液總體積,1 ml;V樣:加入上清液體積(ml),0.005 ml;Cpr:蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣品質(zhì)量(g);T:反應時(shí)間(min),3min。

    b. 使用96孔板測定的計算公式如下

    1、組織中CarE活性

    (3) 按蛋白濃度計算

    CarE活性單位定義:mg組織蛋白在37反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為1個(gè)酶活單位。

     

    CarE酶活(U/mg prot)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總÷(Cpr×V)÷T

    = 13.67×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr

    (4) 按樣本鮮重計算

    CarE活性單位定義:g組織在37反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為1個(gè)酶活單位。

    CarE酶活(U/g 鮮重)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總×V樣總÷V樣)÷W÷T

    =13.67×(△A測定管-△A空白管)÷W

    2、細菌或細胞中CarE活性

    CarE活性單位定義:1萬(wàn)個(gè)細菌或細胞在37反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為一個(gè)CarE活性單位。

    CarE酶活(U/104 cell)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總×V樣總÷V樣)÷細胞密度(104 cell/ml÷T=13.67×(△A測定管-△A空白管細胞密度(104 cell/ml

    3. 液體中CarE活性

    CarE活性單位定義:每毫升樣品在37℃反應體系中每分鐘催化吸光值增加1定義為1個(gè)酶活單位。

    CarE酶活(U/ml )= (△A測定管-△A空白管) ×V反總÷V÷T

    =13.67×(△A測定管-△A空白管)

    V反總:反應體系總體積,205μl=2.05×10-4L;V樣總:上清液總體積,1 ml;V樣:加入上清液體積(ml),0.005 ml;Cpr:蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣品質(zhì)量(g);T:反應時(shí)間(min),3min。

     

     

     

    免费无遮挡无码永久视频-欧洲中文日韩亚洲精品视频-国产在线观看无码免费视频-永久免费无码网站在线观看-国产精品国语对白露脸在线播放