鬼筆環(huán)肽（phalloidin 鬼筆鵝膏素）

——細胞骨架的染色神器

鬼筆環(huán)肽是從毒蕈類(lèi)鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中得到的有毒環(huán)狀七肽，它的作用與細胞松弛素Ｂ恰好相反, 只與聚合的微絲結合, 而不與肌動(dòng)蛋白單體分子結合。鬼筆環(huán)肽通過(guò)與聚合的微絲結合， 抑制了微絲的解體, 破壞了微絲的聚合和解聚的動(dòng)態(tài)平衡。用FITC和Rhodamin等熒光物質(zhì)標記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細胞的F-actin結合，從而顯示微絲骨架在細胞中的分布。

warbio生物提供多款不同熒光基團標記的鬼筆環(huán)肽，可以滿(mǎn)足您多標實(shí)驗的不同需。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

（1）親和力高：Kd= 20 nM；

（2）特異性強：選擇性結合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin，而不會(huì )與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結合；

（2）優(yōu)于抗體染色：鬼筆環(huán)肽無(wú)物種限制，且幾乎不存在非特異性染色，染色區和非染色區域對比性極其明顯；

（4）靈敏度高：納摩爾濃度（nM）染色即可滿(mǎn)足實(shí)驗要求；

（5）兼容性好，肌動(dòng)蛋白活力不受影響：鬼筆環(huán)肽衍生物很小，直徑約12-15?，分子量＜2000 Da，標記后的肌動(dòng)蛋白許多生理特性都得以維持；

（6）適用范圍廣：無(wú)物種差異性；同樣適用于甲醛固定和打孔處理后的組織樣本。

實(shí)驗流程：

鬼筆環(huán)肽的配制：

0.1mg鬼筆環(huán)肽溶于1ml無(wú)水甲醇（也可用DMSO或無(wú)水乙醇溶解）配成貯存液，可在-20度避光的條件下長(cháng)期保存，工作液的濃度為5ug/ml，由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。

染色程序：

生理鹽水PBS清洗細胞2次，每次10分鐘；3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘，生理鹽水PBS清洗細胞2次；加入5ug/ml的FITC-鬼筆環(huán)肽室溫染色30-60分鐘，夏季時(shí)間可以短一些，生理鹽水PBS清洗細胞2次；DAPI或hoechst33258染細胞核10分鐘，生理鹽水PBS清洗細胞2次；吸去多余水分，加熒光封片液（中性或偏堿性緩沖液加等量甘油），蓋上蓋玻片，熒光或共聚焦顯微鏡下觀(guān)察。

染色結果：

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