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    myPOLS Biotec公司開(kāi)發(fā)新一代的DNA聚合酶

    myPOLS Biotec正在開(kāi)發(fā)新一代的DNA聚合酶

           myPOLS Biotec是一家來(lái)自康斯坦茨大學(xué)的生物技術(shù)公司,來(lái)自Andreas Marx教授的研究小組。憑借我們在高通量DNA聚合酶設計方面的專(zhuān)業(yè)知識,我們?yōu)槟膽枚ㄖ泼浮?span>

           研發(fā)活動(dòng)包括:

           改進(jìn)的DNA聚合酶用于SNP檢測和甲基化特異性PCR。

           病原體檢測分析,例如用于流感和諾如病毒診斷。

           具有逆轉錄酶活性的熱穩定DNA聚合酶。

           抑制劑抗性聚合酶,用于從樣品中直接PCR,如全血,唾液,細菌,細胞 - 顆粒,植物等。

    Isotherm2G DNA聚合酶

    myPOLS Biotec正在開(kāi)發(fā)新一代的DNA聚合酶

    用于和可靠的應用,例如個(gè)性化醫療,病原體檢測,DNARNA診斷,法醫學(xué)等等。

    Isotherm2G DNA聚合酶

           是一種嗜溫性DNA聚合酶,非常適合等溫擴增。它可以從具有高鏈置換活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突變,以提高反轉錄活性。在55-70°C之間活躍。Isotherm2G DNA聚合酶是等溫擴增反應的優(yōu)先選擇,如環(huán)介導的等溫擴增(LAMP),鏈置換擴增(SDA),滾環(huán)擴增(RCA),分枝擴增(RAM),基因組擴增等。Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / μl含甘油溶液的形式提供。它與足夠量的10x反應緩沖液一起使用,該緩沖液已針對等溫擴增進(jìn)行了優(yōu)化。緩沖液中含3.25 mM鎂離子,終濃度為1x。鎂,引物和dNTPs的宜濃度在很大程度上取決于所應用的應用,應該對其進(jìn)行優(yōu)化。

    Volcano2G DNA聚合酶

           Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級版本,具有進(jìn)一步改善的逆轉錄活性。該酶是一種經(jīng)過(guò)工程改造的,極耐熱的逆轉錄酶和組合的DNA聚合酶,可通過(guò)定向的人工進(jìn)化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板(無(wú)需等溫逆轉錄步驟)直接促進(jìn)零步驟” RT-PCR,因為逆轉錄與循環(huán)PCR延伸步驟中的DNA擴增同時(shí)進(jìn)行。這也允許在高溫下進(jìn)行逆轉錄反應,從而將在高溫下融化的RNA中強大的二級結構所遇到的問(wèn)題降至低。 

           Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動(dòng)劑配制的,具有逆轉錄酶活性的工程穩定的熱穩定DNA聚合酶和穩健的Taq DNA聚合酶的酶混合物?;谶m體的熱啟動(dòng)劑設計用于在低溫下(例如,在移取反應混合物時(shí))阻斷非特異性DNA聚合酶活性,但會(huì )在高于50-55°C的溫度下分解,從而釋放出現已完全活化的DNA聚合酶。

           Volcano2G DNA聚酶作為5 U / μl甘油庫存與適當的5x Volcano反應緩沖液一起運輸,該緩沖液針對60-300 bp的擴增子進(jìn)行了優(yōu)化。Volcano2G逆轉錄酶可以可靠地從≥1 ng的總RNA輸入中檢測RNA靶標。它不需要Mn 2+即可  獲得宜活性。但是,可以通過(guò)向反應中添加Mn 2+來(lái)進(jìn)一步優(yōu)化某些檢測方法(建議范圍是0.5-1 mM,未提供Mn 2+)。

           RT-PCR活性:已對 Volcano3G RT-PCR Mix進(jìn)行了成功的RT-PCR性能測試。在實(shí)時(shí)PCR循環(huán)儀中從人總RNA提取物中擴增出151 bp片段(HPRT1 mRNA),并可視化為單個(gè)擴增產(chǎn)物。

          DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物監控Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。
    酶濃度由蛋白質(zhì)特異性染色確定。
    帶有“ 0步”方案的便捷RT-PCR零步協(xié)議節省時(shí)間
          跳過(guò)逆轉錄步驟。不需要等溫逆轉錄步驟。 
          Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉錄酶,非常穩定,在95°C下的半衰期> 40分鐘。


    靈敏的RNA檢測
          當添加實(shí)時(shí)PCR染料時(shí),Volcano2G DNA聚合酶也可用于實(shí)時(shí)PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結構域,使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,通過(guò)使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案,使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。
    來(lái)自細胞的直接RT-PCR
          對于細胞RNA的可靠RT-PCR,樣品制備步驟*。然而,這些步驟費力,費時(shí)并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液,您可以用快速便捷的“零步長(cháng)”方案代替費力的RNA制備。
    節省時(shí)間和金錢(qián)
          VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液具有簡(jiǎn)化的“零步驟”工作流程,使您可以規避費力的純化和提取步驟,從而節省了時(shí)間和金錢(qián)。



    出色的靈敏度
          VolcanoCell2G RT-PCR 2x實(shí)現了低至單個(gè)細胞的檢測靈敏度。在此示例中,按照VolcanoCell2G協(xié)議從單個(gè)隆德人中腦(LUHMES)細胞中檢測到GAPDH mRNA。
    Isotherm2G DNA polymerase
          Isotherm2G DNA聚合酶是一種嗜溫DNA聚合酶,它從DNA和RNA模板合成DNA,具有高鏈置換活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代,具有進(jìn)一步改善的逆轉錄活性。宜溫度(55-70°C)使Isotherm2G DNA聚合酶成為等溫擴增反應的優(yōu)先選擇,如環(huán)介導等溫擴增(LAMP),鏈置換擴增(SDA),滾環(huán)擴增(RCA),衍生物擴增(RAM),基因組擴增等。
    #8801S Isotherm2G DNA聚合酶 1600 U,8U /μl,200μl
    #8801M Isotherm2G DNA聚合酶 8000 U,8U /μl,1000μl
    就是這么簡(jiǎn)單:只需在59°C溫育30分鐘,就可以使用LAMP方法擴增DNA目標(紅色曲線(xiàn))和RNA目標(藍色曲線(xiàn))。Isotherm可用于RCA,SDA,RAM,LAMP和許多其他放大技術(shù)。
          Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆轉錄活性。擴增后,可以進(jìn)行熔解曲線(xiàn)測量以確認特定產(chǎn)物的產(chǎn)生。因此可以進(jìn)行DNA和RNA檢測,從而實(shí)現簡(jiǎn)單的反應設置,快速的反應時(shí)間和閉管系統。
    應用
    ? 快速,等溫檢測和鑒定DNA和RNA靶標
    ? 逆轉錄
    ? 實(shí)時(shí)等溫檢測
    ? LAMP,SDA,RCA,RAMP
    ? 入門(mén)擴展
    反應設置
    零件 卷 終濃度
    底漆混合物(各種濃度) 各種μl 各個(gè)
    dNTPs(10 mM) 1μl 400μM
    10 x Isotherm2G反應緩沖液 2.5μl 1X
    等溫線(xiàn)DNA聚合酶8 U /μl 1μl 8 U /反應
    模板/樣品提取物 各種μl 各個(gè)
    不含核酸酶的水 總反應體積高達25μl  
    將所有組件保存在冰上。
    在使用前仔細旋轉并混合所有溶液。 
    引物混合物和濃度很大程度上取決于所采用的等溫反應方法。
    Isotherm2G和Isotherm2G反應緩沖液不含熒光染料。對于實(shí)時(shí)測量,請添加適量的合適染料。
    詳細的產(chǎn)品說(shuō)明
    內容
    Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有針對等溫擴增優(yōu)化的10倍反應緩沖液。
    質(zhì)量控制
    DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物監測等溫線(xiàn)活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。
    通過(guò)蛋白質(zhì)特異性染色確定酶濃度。有關(guān)批次特定濃度,請通過(guò)info@mypols.de查詢(xún)更多信息。 
    法律信息
    某些等溫擴增方法可能受到保護。購買(mǎi)此產(chǎn)品不會(huì )向購買(mǎi)者傳達使用所購產(chǎn)品進(jìn)行任何商業(yè)目的的任何等溫擴增方法的合法權利。
    存儲
    本產(chǎn)品采用冷藏包裝。請在抵達-20°C時(shí)存放產(chǎn)品。

    品牌

    貨號

    品名

    規格

    mypols

    8100S

    Volcano2G DNA聚合酶

     250 U,5U /μl,50μl

    mypols

    8100M

    Volcano2G DNA聚合酶

    1000U,5U /μl,200μl

    mypols

    6101S

    Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

    100 reactions á 25 μl,1 x 1.25 ml

    mypols

    6101M

    Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

    500 reactions á 25 μl,5 x 1.25 ml

    mypols

    6201S

    Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX)

    100 reactions á 25 μl,1 x 1.25 ml

    mypols

    6301S

    Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye)

    100 reactions á 25 μl,1 x 1.25 ml

    mypols

    6401S

    Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

    100 reactions á 25 μl,1 x 1.25 ml

    mypols

    7101S

    VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

    100 reactions à 25 μl, 1 x 1.25 ml

    mypols


    VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

    500 reactions à 25 μl, 5 x 1.25 ml

    mypols

    8801S

    Isotherm2G DNA polymerase

    1600 U, 8U/μl, 200 μl

    mypols

    8801M

    Isotherm2G DNA polymerase

    8000 U, 8U/μl, 1000 μl

    官網(wǎng)鏈接:https://www.mypols.de/

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